中性木聚糖酶测定试剂盒/中性半纤维素酶测定试剂盒/分光光度法/24样
测定意义:
木聚糖酶(EC 3.2.1.8)主要由微生物产生,能催化水解木聚糖,也被称为戊聚糖酶或半纤维素酶,可分解酿造或饲料工业中的原料细胞壁以及 β-葡聚糖,降低酿造中物料的粘度,促进有效物质的释放,以及降低饲料中的非淀粉多糖,促进营养物质的吸收利用,因而广泛的应用于酿造和饲料工业中,NEX 一般分离自最适生长 pH 为 6-8 的微生物。
测定原理:
NEX 在中性环境中催化木聚糖降解成还原性寡糖和单糖,在沸水浴条件下进一步与 3,5-二硝基水杨酸发生显色反应,在 540nm 处有特征吸收峰,反应液颜色的深浅与酶解产生的还原糖量成正比,通过测定反应液在 540nm 吸光值增加速率,可计算 NEX 活力。
自备仪器和用品:
天平、低温离心机、恒温水浴锅,可见分光光度计、1 mL 玻璃比色皿和蒸馏水。测定操作表:
对照管
测定管
样品(μL)
200
缓冲液(μL)
300
试剂一 (μ L)
试剂二(μL)
混匀,盖紧瓶盖,50℃水浴,反应 30min ,立即沸水浴 20min 灭活。(注意不要让盖子爆开,以免进水,改
变了反应体系)
混匀,盖紧瓶盖,50℃水浴,反应 30min ,立即沸水浴 20min 灭活。(注意不要让盖子爆开,以免进水,改变了反应体系)
混匀,沸水浴显色 5min(注意不要让盖子爆开,以免进水改变了反应体系) ,1mL 玻璃比色皿,540nm 处测定吸光值 A ,计算 ΔA=A 测定管-A 对照管。每个测定管设一个对照管。
注 意:
1、吸光度变化应该控制在 0.01~0.8 之间,否则加大样品量或稀释样品,注意计算公式中参与计算的稀释倍数要相应改变;也可以延长或者缩短反应时间。
2、试剂盒 2-8℃保存,保质期 3 个月,建议尽快使用。
上海酶联生物科技有限公司
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