商品属性

产品名称 | PK-1人胰腺导管腺癌细胞 | 英文名称 | PK-1 |
规格 | 1×106 | 货号 | P-X9155 |
种属来源:人
组织来源:胰腺导管腺癌
细胞类型:贴壁生长
生物安全等级:BSL-1(需在二级生物安全柜中操作)
保藏机构编号:JCRB Cell Bank IFO50321 / ECACC 94092053
关键特性

背景:源自68岁日本男性胰腺导管腺癌患者手术样本(1985年建系)。
形态:上皮细胞样,贴壁生长,可形成不规则岛状或腺样结构。
肿瘤标志物:表达CK7、CA19-9,低表达CEA。
基因特征:携带KRAS突变(常见于胰腺癌),TP53缺失。
致瘤性:在裸鼠体内可形成转移性肿瘤。
培养条件与试剂

| 项目 | 要求 |
| 基础培养基 | RPMI-1640 |
| 补充剂 | 10% 胎牛血清(FBS) |
| 生长添加剂 | 1% 非必需氨基酸(NEAA) |
| | 1% 青霉素-链霉素(100 U/mL)|
| 培养环境 | 37°C,5% CO₂,饱和湿度 |
| 传代周期 | 每3-4天(80-90%密度时) |
操作流程

复苏步骤
迅速解冻细胞(37°C水浴≤1分钟);
转移至含5mL培养基的离心管,1000 rpm离心5分钟;
弃上清,重悬细胞接种于T25培养瓶。
传代步骤
弃培养基,PBS洗涤1次;
加入0.25%胰酶-EDTA,37°C消化1-3分钟;
加入含血清培养基终止消化,吹打成单细胞悬液;
按1:3~1:5比例接种新瓶(建议密度≥5×10⁴ cells/cm²)。
冻存步骤
消化收集细胞,离心后重悬于冻存液(90% FBS + 10% DMSO);
分装至冻存管(密度5-10×10⁶ cells/mL);
程序降温:4°C(30min)→ -80°C(24h)→ 液氮长期保存。
质量控制
无菌检测:支原体、细菌、真菌阴性(PCR/MYC检)。
STR鉴定:定期验证人源特异性(数据库比对确认)。
增殖稳定性:连续传代后维持典型形态及生长曲线(倍增时间≈30小时)。
注意事项

关键提示:
避免过度消化(胰酶暴露时间≤3分钟);
血清批次需预先测试支持生长能力;
冻存后复苏存活率通常为70-85%,建议使用专用复苏培养基。
应用领域
胰腺癌转移机制研究
化疗药物敏感性筛选(如吉西他滨耐药模型)
靶向治疗(如KRAS抑制剂)体外评价
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关键字: PK-1;人胰腺导管腺癌细胞;