山梨醇脱氢酶(SH)测定试剂盒/微量法/96样
测定意义:
SH(EC 1.1.1.14 )催化山梨醇脱氢生成果糖,是调控生物体内山梨醇含量的关健酶之一。
测定原理:
SH 催化山梨醇脱氢生成果糖,同时还原 NAD+生成 NADH,测定 340nm 吸光度增加速率可以计算 SH 活性。
自备仪器和用品:
紫外分光光度计/酶标仪、台式离心机、水浴锅、可调式移液器、微量石英比色皿/96 孔板、研钵、冰和蒸馏水。测定步骤:1、 分光光度计预热 30min 以上,调节波长至 340nm,蒸馏水调零。2、 样本测定(1)在试剂二中加入 7.6mL 试剂一和 11.4mL 蒸馏水充分溶解,置于 37℃(哺乳动物)或 25℃(其它物种)水浴 5min;用不完的试剂 4℃保存一周;(2)在微量石英比色皿或 96 孔板中加入 10μL 样本和 190μL 试剂二,混匀,立即记录 340nm 处 20s 时的吸光值 A1 和 2min20s 后的吸光值 A2 ,计算 ΔA=A2-A1。
注 意:
正式测定前务必取 2-3 个预期差异较大的样本做预测定。
上海酶联生物科技有限公司
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