线粒体呼吸链复合体Ⅳ/细胞色素C氧化酶测定试剂盒/分光光度法/24样
测定意义:
线粒体复合体Ⅳ又称细胞色素 C 氧化酶,也是线粒体呼吸电子传递链主路和支路的共有成分,负责催化还原型细胞色素 C 的氧化,并最终把电子传递给氧,生成水。
测定原理:
自备仪器和用品:
可见分光光度计、台式离心机、水浴锅、可调式移液器、1mL 玻璃比色皿、研钵、冰和蒸馏水。测定步骤:1、分光光度计预热 30min 以上,调节波长至 550nm,蒸馏水调零。
2、样本测定
(1) 工作液的配制:临用前取试剂四、试剂五、试剂六各一支,将试剂五和试剂六依次转移到试剂四中混合溶解;用不完的试剂分装后-20℃保存,禁止反复冻融。
(2) 将工作液置于37℃(哺乳动物)或 25℃(其它物种)孵育5min;
(3) 在1mL玻璃比色皿中加入 80μL 样本和 800μL工作液,混匀,记录550nm处初始吸光值 A1和37℃反应 30min 后的吸光值A2 ,计算ΔA=A1-A2。
注 意:
正式测定前务必取 2-3 个预期差异较大的样本做预测定。
上海酶联生物科技有限公司
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