单宁含量测定试剂盒/微量法/96样
测定意义:
单宁是一类广泛存在于植物体内的多元酚化合物,又称植物多酚。具有独特的化学性质和多种生理活性,如能与蛋白质、生物碱、多糖结合;能与多种金属离子发生络合或静电作用;具有止血、抑制微生物、抗过敏、抗突变、抗肿瘤、抗衰老等生理活性。
测定原理:
单宁在碱性环境下与磷钼酸反应,生成蓝色化合物,在 760nm 处有最大吸收峰。
自备仪器和用品:
可见分光光度计/酶标仪、水浴锅、可调式移液器、微量石英比色皿/96 孔板、研钵和蒸馏水。测定步骤:
1、分光光度计或酶标仪预热 30min 以上,调节波长至 760nm 处,蒸馏水调零;试剂一和试剂二 37℃预热10min 以上;
2、操作表:
试剂名称(µL)
对照管
测定管
样本
5
蒸馏水
135
130
试剂一
35
混匀,室温静置 5min
试剂二
30
混匀,室温静置 30min ,760nm 处读取吸光值 A ,ΔA=A 测定-A 对照,对照管只要做一管。
注 意:
1 、 ΔA 控制在 0.02–0.5 范围内,若ΔA 大于 0.5,将样本提取上清液用蒸馏水稀释 10 倍后检测,计算公式中乘以相应稀释倍数。
2 、 标准曲线线性范围为:0.025mg/mL–0.5mg/mL。
上海酶联生物科技有限公司
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