总巯基测定试剂盒/微量法/48S
测定意义:
生物体内巯基主要包括谷胱甘肽巯基和蛋白质巯基。前者不仅能够修复氧化损伤的蛋白质,而且参与活性氧清除,后者对于维持蛋白质构象具有重要作用。通过测定总巯基含量和 GSH 含量,能够间接测定蛋白质巯基含量。
测定原理:
巯基基团与 5,5’-二硫代-双-硝基苯甲酸(DTNB)反应,生成黄色化合物,在 412nm 处有最大吸收峰。
自备仪器和用品:
天平、研钵、恒温水浴锅、酶标仪、96 孔板、乙醇和蒸馏水。操作步骤:
1、酶标仪预热 30min ,调节波长至 412nm。
2、操作表
对照管
测定管
样品(μL)
40
试剂一 (μL)
150
试剂二(μL)
10
乙醇(μL)
混匀,25℃静置 10min ,测定 412nm 吸光值。ΔA=A 测定-A 对照。每个测定管设一个对照管。
注 意:
正式测定之前选择 2-3 个预期差异大的样本做预测定。
上海酶联生物科技有限公司
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