二胺氧化酶(DAO)测定试剂盒/微量法/48S
测定意义:
DAO(EC1.4.3.6)广泛存在于动物(肠粘膜、肺、肝脏、肾脏等)、植物和微生物中。催化多胺氧化为醛,其活性与核酸和蛋白合成密切相关,能够反映肠道机械屏障的完整性和受损伤程度。
测定原理:
DAO 催化尸胺产生醛和过氧化氢,外源添加过量的辣根过氧化物酶,催化过氧化氢氧化邻联茴香胺生成氧化型邻联茴香胺,在 460nm 处有特征吸收峰,通过测定该波长吸光度增加速率,计算 DAO 活性。
自备仪器和用品:
天平、低温离心机、可见分光光度计/酶标仪、微量石英比色皿/96 孔板、蒸馏水。测定步骤和操作表:
1、分光光度计/酶标仪预热30min ,调节波长至 460nm,蒸馏水调零。
2、操作表
对照管
测定管
粗酶液(μL)
50
提取液(μL)
128
108
试剂一 (μL)
2
试剂二(μL)
20
试剂三(μL)
混匀,37℃水浴 30min,微量石英比色皿/96 孔板,蒸馏水调零,测定 460nm 吸光值。ΔA=A 测定-A 对照。
注 意:
正式测定之前选择 2-3 个预期差异大的样本做预测定。
上海酶联生物科技有限公司
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