单纯疱疹病毒Ⅱ型检测试剂盒
试剂简介:
单纯疱疹病毒Ⅱ型(HSV-2)检测试剂盒用于检测人体样本中是否存在HSV-2核酸或抗体,HSV-2主要引起生殖器疱疹,是一种常见的性传播疾病。
产品名称 | 单纯疱疹病毒Ⅱ型检测试剂盒 | 分类 | 荧光PCR |
货号 | XG-P1484 | 用途 | 仅供科研研究实验 |
1. PCR法检测试剂盒
1.1 技术原理
针对HSV-2保守基因序列设计特异性引物和荧光探针,实时监测PCR扩增过程中的荧光信号变化,定量或定性检测病毒核酸。
1.2 产品特点
高灵敏度:可检测低病毒载量样本,灵敏度优于传统方法。
高特异性:引物和探针针对HSV-2保守区设计,避免与其他病毒交叉反应。
快速高效:整个检测过程约1.5-2小时,适合快速诊断。
自动化兼容:适配主流荧光定量PCR仪,支持高通量检测。
1.3 操作流程
实验分区要求:
试剂准备区
样本处理区
扩增及产物分析区
具体步骤:
样本采集与处理:
采集疑似感染病人的生殖道分泌物或血液样本。
提取病毒DNA,操作需在冰上进行以避免核酸降解。
试剂准备:
从-20℃取出试剂盒,融化并混匀组分。
配制PCR反应液:按比例混合缓冲液、dNTPs、引物、探针和聚合酶。
加样与扩增:
在PCR反应管中加入处理好的样本DNA或对照品(5μL/管),终体积25μL。
设置PCR程序:95℃预变性15分钟,然后45个循环(94℃ 15秒,58℃ 45秒),实时采集荧光信号。
结果分析:
通过Ct值(循环阈值)判断样本是否为阳性,Ct值越小表示病毒载量越高。
阳性对照应出现典型扩增曲线,阴性对照应无扩增或Ct值大于。
2. 血清学检测法(ELISA)试剂盒
2.1 技术原理
利用特异性抗体检测样本中的HSV-2抗体(IgG/IgM),通过酶联显色反应判断结果。
2.2 产品特点
操作简便:适合大规模筛查。
成本较低:相对于PCR法,成本较低。
可能存在交叉反应:不能区分活跃感染与既往感染
2.3 操作流程
具体步骤:
样本采集与处理:
采集疑似感染病人的静脉血,分离血清或血浆。
加样与温育:
将样本加入包被有HSV-2抗原的微孔板中,温育使抗体与抗原结合。
洗涤:
弃去孔内液体,用洗涤液洗板数次,拍干。
加酶标抗体:
加入酶标记的抗人IgG/IgM抗体,温育使酶标抗体与样本中的抗体结合。
洗涤:
再次洗涤微孔板,拍干。
显色:
加入底物溶液,观察颜色变化。
终止与读数:
加入终止液终止反应,用酶标仪在特定波长下读取吸光度值。
结果分析:
根据标准曲线或临界值判断样本是否为阳性。
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