单纯疱疹病毒 I 型 /II 型检测试剂盒(双重荧光 PCR 法 )
试剂简介:
单纯疱疹病毒 I 型/II 型检测试剂盒(双重荧光 PCR 法)是一种用于同时检测单纯疱疹病毒 I 型(HSV-1)和 II 型(HSV-2)的分子诊断工具,采用双重荧光 PCR 技术,具有高特异性、高灵敏度和操作简便的特点。
产品名称 | 单纯疱疹病毒 I 型 /II 型检测试剂盒(双重荧光 PCR 法 ) | 分类 | 荧光PCR |
货号 | XG-P1487 | 用途 | 仅供科研研究实验 |
技术原理
检测原理:基于双重TaqMan探针实时荧光定量PCR技术,针对HSV-1和HSV-2基因组中高度保守的区域(如DNA聚合酶基因)设计特异性引物和荧光探针。
在PCR扩增过程中,两种病毒的核酸分别与对应的探针结合,释放不同荧光信号(如FAM通道用于HSV-1,VIC通道用于HSV-2),通过实时监测荧光强度变化实现病毒核酸的定性和/或定量检测。
产品规格与性能参数
包装规格:常见为48T/盒或50T/盒,包含反应液、酶液、阳性质控品、阴性质控品等组分。
检测范围:通常为2×103~1×10? copies/mL。
最低检测限:可达1×103 copies/mL,部分试剂盒灵敏度更高。
保存条件:-20℃避光保存,有效期一般为12个月。
操作流程与特点
操作分区要求:实验需严格分区操作(试剂准备区、样本制备区、扩增及产物分析区),避免交叉污染。
具体操作步骤:
样本采集与处理:采集疑似感染部位的样本(如疱液、宫颈分泌物、脑脊液等),提取病毒DNA模板。
试剂配制:在冰盒中操作,按说明书配制PCR反应体系,加入反应液、酶液、引物、探针和模板DNA。
PCR扩增:设置荧光定量PCR仪参数(如预变性:95℃ 5分钟;循环:95℃ 15秒→60℃ 60秒,40个循环),选择FAM和VIC等荧光通道进行检测。
结果分析:根据Ct值和扩增曲线判定结果(Ct≤35为阳性,Ct≥40为阴性,35<Ct<40需复检),同时确保质控品结果符合要求。
操作特点:
高灵敏度:可检测低病毒载量样本,适用于早期诊断。
高特异性:避免与其他病毒交叉反应。
快速高效:全程检测时间1.5-2小时,远快于传统病毒培养方法。
自动化兼容:适配主流PCR仪,支持高通量检测。
注意事项与质量控制
防污染措施:实验分区物理隔离,使用一次性吸头和专用工具,反应液避光保存,禁止开盖防止气溶胶污染。
质量控制:每次检测需设置阴性对照(无特异性扩增曲线)和阳性对照(Ct值≤35),确保结果有效性。
应用领域与局限性
应用领域:主要用于单纯疱疹病毒感染的临床诊断、流行病学调查和科研实验,也可用于新生儿感染筛查和免疫缺陷患者监测。
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关键字: 单纯疱疹病毒 I 型;检测试剂盒;双重荧光 PCR 法;
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