产品信息：
产品名称 | 人大细胞肺癌细胞；801-D | 英文名称 | D：D |
货号 | AXB10472 | 生长特性 | 贴壁生长 |
用途 | 仅用于科研 实验 | 种属 | 人 |
源自58岁男性肺巨细胞癌组织，是PLA-801细胞系的高转移克隆株。
分子特征：高表达端粒酶活性，携带p53突变，具备强侵袭能力。
应用领域：
肺癌转移机制研究（如EMT过程）
化疗药物敏感性测试（如顺铂、紫杉醇）
肿瘤微环境互作模型。
形态与生长
形态：上皮细胞样，呈多边形铺路石状。
生长特性：严格贴壁生长，形成致密单层，增殖速度中等（传代周期2-3天）。
倍增时间：约38-48小时（37℃条件下）。
培养操作指南
培养体系与条件
基础培养基 RPMI-1640（推荐）或DMEM高糖培养基
添加成分 10%胎牛血清（FBS） + 1%青霉素-链霉素（P/S）
培养环境 温度：37℃ ；
气相：空气95% + CO? 5%
传代比例 1:2至1:3（胰酶消化时间1-2分钟）
冻存条件 50%基础培养基 + 40% FBS + 10% DMSO，液氮储存
操作步骤
复苏
37℃水浴快速解冻冻存管，加入5 mL完全培养基混匀，离心（1000 RPM，5分钟）后重悬接种至T25瓶。
关键点：次日换液去除死细胞，连续观察2-3天。
传代
PBS清洗后，加入0.25%胰蛋白酶-EDTA消化1-2分钟（显微镜下观察细胞变圆脱落），加完全培养基终止消化。
注意事项：
消化时间需严格控制（过度消化损伤细胞）；
吹打均匀避免细胞团块。
冻存
汇合度80%时消化，离心后用冻存液重悬，程序降温（-1℃/min）至-80℃后转入液氮。
三、关键注意事项
污染防控
定期检测支原体（推荐PCR法），避免交叉污染。
培养细节
贴壁问题：若运输后细胞脱落，可离心收集（1000 RPM，5分钟）后重新接种。
血清浓度：初始培养可提高至15% FBS促进贴壁，稳定后恢复10%。
实验应用
药物敏感性检测：推荐CCK-8法（接种密度5×103 cells/孔）。
侵袭实验：Transwell小室铺Matrigel模拟基底膜（细胞悬液含1% FBS）。
四、常见问题与解决方案
问题 原因 解决方案
细胞消化过度 胰酶作用时间过长 缩短至1分钟内，及时终止消化
生长缓慢 血清质量或密度过高 更换优质FBS，密度控制在5×10? cells/mL
细胞老化 传代次数过多（＞20代） 早期冻存主细胞库，避免长期传代
公司正在出售的产品：
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关键字： 801-D;人大细胞肺癌细胞;贴壁细胞;
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