人大细胞淋巴瘤细胞；SU-DHL-6
产品信息：
产品名称 | 人大细胞淋巴瘤细胞；SU-DHL-6 | 英文名称 | SU-DHL-6：SUDHL6 |
货号 | AXB10405 | 生长特性 | 悬浮生长 |
衍生于一名43岁男性弥漫性大B细胞淋巴瘤（DLBCL）患者的腹水样本，属B细胞来源。
关键遗传特征：携带t(14;18)(q32;q21)染色体易位，导致BCL-2基因异常表达，促进肿瘤细胞抗凋亡。
EB病毒状态：EBV阴性。
生物安全等级：BSL-1。
形态与生长特性
形态：淋巴母细胞样，胞体呈圆形或椭圆形。
生长方式：悬浮生长，不贴壁，常以细胞团形式存在。
倍增时间：约35-40小时。
功能应用
适用于淋巴瘤发病机制、药物筛选（如BCL-2抑制剂）、免疫治疗及耐药性研究。
培养操作流程
培养基与试剂
基础培养基：RPMI-1640（推荐含L-谷氨酰胺）。
添加成分：
10%胎牛血清（FBS）
1%青霉素-链霉素（P/S）
可选：2 mM L-谷氨酰胺或1 mM丙酮酸钠（根据实验需求）。
冻存液：90% FBS + 10% DMSO（现配现用）。
传代培养（悬浮细胞）
细胞密度监控：
维持密度在 2×10?–1×10? cells/mL，超过1.5×10? cells/mL需传代。
传代步骤：
离心法：1000 rpm离心5分钟，弃上清，用新鲜培养基重悬后按 1:2至1:4比例 分瓶。
半换液法：弃去50%旧培养基，补加等体积新鲜培养基，适用于细胞团较多的样本。
培养容器：
T25培养瓶加6–8 mL培养基，T75瓶加15 mL，避免液体过深影响气体交换。
冻存与复苏
冻存：
收集对数生长期细胞，密度调至5×10?–1×10? cells/mL，程序性冻存（-80℃过夜→液氮）。
复苏：
37℃水浴快速解冻，加4–5 mL预温培养基稀释，离心后重悬接种。
关键注意事项
细胞状态维护
换液频率：每2天半换液一次（即使培养基未变黄），避免代谢废物积累。
细胞团处理：轻柔吹打分散大细胞团，避免剧烈震荡导致细胞损伤。
密度监控：低于2×10? cells/mL时生长迟缓，需提高血清浓度至15%–20%。
污染与质控
支原体检测阴性（供应商提供报告）。
STR鉴定位点包括：CSF1PO、D13S317、vWA等，确保细胞系纯度。
常见问题处理
细胞碎片多：900 rpm低速离心3分钟，PBS洗涤一次后重悬。
生长缓慢：检查CO?浓度（5%）及培养基pH（7.2–7.4），避免频繁开箱。
复苏后死亡：确认冻存时细胞活性＞90%，解冻后立即稀释DMSO。
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