商品属性
产品名称
A549/DDP(人肺腺癌耐顺铂株)
英文名称
A549/DDP
规格
1×106
货号
P-X10483
名称:A549/DDP(人肺腺癌耐顺铂株)
种属:人
组织来源:肺腺癌
生物安全等级:BSL-1
细胞形态:上皮细胞样
生长特性:贴壁生长
培养条件
培养基:Ham's F-12K培养基(含2.5g/L NaHCO₃)
血清添加:10%优质胎牛血清(FBS)
药物诱导:含1-2μg/ml顺铂(DDP)
气相环境:95%空气,5% CO₂
培养温度:37℃
生长周期:3~4天
耐药特性
该细胞株通过逐步提高DDP浓度(起始1μg/mL,最终28μg/mL)诱导获得稳定耐药性,可在含DDP的培养液中持续增殖。
传代步骤
细胞观察:待细胞密度达80%-90%时进行传代。
PBS润洗:弃旧培养基,用无钙镁PBS轻柔润洗1-2次。
消化:加入0.25%胰蛋白酶-0.53mM EDTA消化液,37℃孵育1-2分钟,显微镜下确认细胞变圆脱落。
终止消化:轻敲培养瓶后加入少量培养基终止反应。
离心重悬:收集细胞悬液离心(1000rpm, 5分钟),按1:3~1:8比例接种至新培养瓶。
冻存与复苏
冻存液:含10% DMSO的完全培养基。
冻存密度:建议1×10⁶ cells/mL。
存储条件:液氮长期保存。
注意事项
换液频率:每2~3天更换一次培养基。
耐药维持:传代时需持续添加DDP至终浓度1μg/mL,避免耐药性丢失。
污染防控:操作需在无菌环境下进行,定期检测支原体。
应用领域
肿瘤耐药机制研究、hua疗药物筛选、基因表达分析等。
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