传染性对虾皮下和造血器官坏死病毒(IHHNV)检测试剂盒(荧光PCR法)
试剂简介:
检测目标
特异性检测**传染性胸膜肺炎放线杆菌(Actinobacillus pleuropneumoniae, APP)**的核酸(如16S rRNA或毒力基因apxIV)。
可区分不同血清型(如1-12型或15型),部分试剂盒支持分型检测。
产品名称 | 传染性对虾皮下和造血器官坏死病毒(IHHNV)检测试剂盒(荧光PCR法) | 分类 | 荧光PCR |
货号 | XG-P1516 | 用途 | 仅供科研研究实验 |
方法原理
荧光定量PCR(qPCR):通过特异性引物和荧光探针扩增APP靶基因,实时监测荧光信号,定量或定性判断样本中APP的存在。
适用样本
猪肺组织、胸腔积液、鼻拭子、血液等临床样本;也可用于环境样本(如饲料、水样)的筛查。
二、试剂盒组成
核心组分
PCR反应液:含Taq酶、dNTPs、缓冲液等。
引物探针混合液:针对APP保守基因设计。
阳性对照(APP标准品)与阴性对照(无核酸水)。
DNA提取试剂(如磁珠法或柱提法)。
辅助材料
说明书、八联管/96孔板、封膜等耗材。
三、操作流程
样本处理
DNA提取:按说明书步骤提取样本DNA,避免交叉污染。
质量控制:建议同步提取阳性/阴性对照。
PCR扩增
配制反应体系(通常20-50μL),加入模板DNA。
上机运行程序(示例):
预变性:95℃ 2分钟
循环阶段:95℃ 10秒 → 60℃ 30秒(40-45循环,采集荧光信号)。
数据分析
阈值设定:根据基线调整荧光阈值。
Ct值判读:Ct≤35且曲线呈S型为阳性;Ct>35或无扩增为阴性。
四、结果解读
阳性结果
表明样本中存在APP核酸,需结合临床症状判断感染状态。
定量试剂盒可通过标准曲线计算病原体载量。
阴性结果
未检出APP,但需排除采样误差或PCR抑制物干扰。
注意事项
假阴性风险:样本中病原体含量低或提取效率差。
假阳性风险:交叉污染或引物非特异性结合。
五、应用场景
临床诊断:快速确诊猪群APP感染,指导用药。
流行病学调查:追踪疫情源头或血清型分布。
净化监测:评估养殖场消毒或疫苗接种效果。
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关键字: 传染性对虾皮下和造血器官坏死病毒;检测试剂盒;PCR-荧光法;
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