商品属性:
产品名称
迟缓爱德华氏菌检测试剂盒(恒温荧光法)
检测方法
荧光PCR法
货号
XG-P1521
应用范围
核酸的定性检测
规格
50T
用途
仅供科研研究实验
赤点石斑鱼神经坏死病毒(RGNNV)检测试剂盒是一种基于实时荧光定量PCR技术的高灵敏度诊断工具,专门用于检测石斑鱼等海水鱼类中的RGNNV感染。该病毒是水产养殖业最具破坏性的病原体之一,可导致高达100%的幼鱼死亡率,造成重大经济损失。
本试剂盒采用TaqMan探针技术,针对RGNNV RNA2片段的高度保守区域设计特异性引物和探针,具有以下突出特点:
检测灵敏度达10拷贝/μL
特异性不与SJNNV、BFNNV等其他神经坏死病毒亚型交叉反应
全程检测时间仅需2小时
可同时处理96份样本的高通量检测能力
二、检测原理与技术特点
1. 核心技术原理
本试剂盒采用一步法RT-qPCR技术,整合了逆转录和实时荧光定量PCR两个过程:
逆转录阶段:在42-50℃下,逆转录酶将病毒RNA转化为cDNA
PCR扩增阶段:Taq DNA聚合酶在特异性引物引导下扩增目标序列
荧光检测:探针与目标序列结合后,报告基团与淬灭基团分离产生荧光信号
2. 创新性设计
双标记探针设计:采用FAM标记检测通道,HEX/VIC标记内参通道
热启动酶技术:减少非特异性扩增
UNG防污染系统:预防PCR产物污染导致的假阳性
内标监控系统:确保RNA提取质量和抑制因素监测
三、试剂盒组成与储存
1. 主要组分
组分名称 规格
RT-qPCR预混液 1.25mL
RGNNV引物探针混合液 200μL
内参引物探针混合液 200μL
阳性对照 100μL
阴性对照 100μL
RNase抑制剂 50μL
2. 储存条件
未开封试剂:-20℃避光保存,有效期12个月
开封后试剂:分装保存,避免反复冻融(≤3次)
配制好的工作液:4℃保存不超过1周
运输条件:干冰运输或2-8℃冰袋运输
四、样本采集与处理规范
1. 最佳样本类型
脑和视网膜组织:病毒含量最高
脾脏和肾脏:次优选择
鱼卵和仔鱼:全鱼匀浆
养殖水体:需浓缩处理
2. 采样注意事项
活体采样:使用无菌器械快速取样,避免组织自溶
濒死鱼采样:死亡后1小时内完成,4℃暂存
样本量:每份50-100mg组织
保存液:立即放入RNA保存液或液氮速冻
记录信息:采样日期、鱼体规格、临床症状等
3. RNA提取要点
推荐使用配套RNA提取试剂盒
提取过程应在RNase-free环境下进行
提取的RNA应测定A260/A280比值(1.8-2.0为佳)
短期可存于-80℃,长期建议分装保存
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