HACAT+LUC人永生化表皮细胞荧光素酶标记
商品属性
产品名称 | HACAT+LUC人永生化表皮细胞荧光素酶标记 | 英文名称 | HACAT+LUC |
规格 | 1×106 | 细胞形态 | 贴壁生长 |
货号 | P-X724 | 细胞生长 | 上皮细胞样 |
产品概述
本产品为永生化人表皮细胞系(HaCat)经慢病毒转染稳定表达荧光素酶(Luciferase, LUC)的工程化细胞,适用于肿瘤微环境研究、药物筛选、活体成像等科研用途。细胞源自62岁黑色素瘤患者病灶外围正常,经STR鉴定确认来源,表达角蛋白、角化细胞交联外膜蛋白及中间丝相关蛋白。
细胞特性
来源:正常表皮组织,上皮细胞样形态,贴壁生长。
标记基因:通过慢病毒转染携带Luc基因,荧光强度随传代次数增加可能减弱,建议定期用嘌呤霉素筛选维持表达。
规格:
冻存管包装:1 mL冻存液,含细胞数>1×10^6。
T25培养瓶:复苏后活细胞常温运输。
用途:仅供科研使用,不可用于临床诊断或治疗。
运输与保存
冻存细胞:干冰运输,接收后立即转入-80℃冰箱(过夜后移至液氮)或直接复苏。若发现干冰挥发、管体破损或污染,需及时联系。
活细胞:T25瓶常温运输,接收后75%酒精消毒瓶壁,置于37℃培养箱静置2-3小时,观察贴壁情况。
细胞接收处理流程
初步检查:显微镜下(4×或5×物镜)确认细胞状态,拍摄10×、20×显微照片及培养瓶外观留存。
贴壁细胞处理:
若细胞密度<60%,去除原培养基(离心回收悬浮细胞),更换新鲜培养基继续培养。
若细胞脱落成团,离心后重悬接种至新瓶。
污染处理:如发现污染或培养液异常,需立即终止实验并联系技术支持。
荧光素酶表达维持(筛选建议)
传代要求:建议至少传3代后冻存备份,再进行嘌呤霉素筛选。
筛选步骤:
初始浓度:1 μg/mL嘌呤霉素完全培养基,观察细胞漂浮情况。
逐步递增:若无明显漂浮,可提高至2 μg/mL,最终不超过5 μg/mL。
终止条件:若漂浮细胞>60%,暂停筛选并更换正常培养基;若细胞在5 μg/mL下正常增殖,可停止筛选。
注意事项
稳定性:长期传代可能导致Luc基因表达下降,建议定期检测荧光强度。
培养基:首次传代需更换含双抗的新鲜培养基,冻存后培养基可省略抗生素。
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关键字: HACAT+LUC;人永生化表皮细胞荧光素;