Single One-Step Cloning kit

1. 产品介绍

    该产品是基于同源重组原理开发的一步法单片段无缝克隆试剂盒，属于非连接酶依赖型体系，载体自连背景极低。高度优化的 2×Single CloneMix 预混了增强型重组酶和重组反应所需缓冲液，可显著提高克隆的重组效率及对杂质的耐受程度，因此制备的高纯度线性化载体和插入片段可不纯化直接用于重组克隆，大大简化了实验操作。 

    本试剂盒可以将含有载体末端重叠区域的插入片段定向重组至任何载体的任何位点，不受酶切位点限制（特殊情况，如有毒基因的克隆或插入外源DNA 后导致质粒本身不稳定等除外）插入单个片段，载体末端与插入片段末端以及相邻插入片段末端之间需要15-25bp 能够相互同源重组的完全一致的序列。插入片段和线性化载体在重组酶作用下，仅需 50℃反应5-30min 即可完成重组，重组产物不依赖连接酶直接转化至感受态细胞，所获得的阳性克隆率在95%以上。本产品适用于单个片段的快速无缝克隆、定点突变和高通量克隆等实验。

2. 产品特点 

1).反应快速，节省时间：可在5-30 min 内完成重组。 

2).使用方便，可进行高通量克隆：不受酶切位点限制，无需对片段酶切。 

3).无缝克隆：不引入额外序列。

3. 试剂盒组成

注：a.阳性对照 Control 中包含了 1.6 kb 的线性化载体和 1 kb 的插入片段，Amp 抗性。使用时直接取 10 μL Control 加入 10 μL 2×Single CloneMix，即组成 20 μL 重组反应体系。

4. 储存事项 

-20℃储存，2-8℃运输。 

5. 稳定性 

本试剂盒在-20℃储存24 个月不影响使用效果。