产品介绍：
兔VEGF-A ELISA试剂盒用于定量检测兔血清、血浆、组织匀浆、细胞培养上清等样本中的血管内皮生长因子A（VEGF-A），采用双抗体夹心法，具有高灵敏度和特异性，结果准确可靠，广泛应用于肿瘤血管生成、伤口愈合、心血管疾病和肿瘤微环境等科研领域。
产品名称 | 兔VEGF-Aelisa试剂盒 | 英文名称 | Rabbit VEGF-A ELISA Kit |
规格 | 48T/96T | 货号 | A130008 |
1. 检测原理
微孔板预包被抗兔VEGF-A抗体，样本中的VEGF-A与抗体结合后，加入酶标检测抗体，形成免疫复合物，通过TMB显色反应，颜色深浅与样本中VEGF-A浓度成正相关。
2. 主要组成
预包被抗体的微孔板
酶标抗体
标准品
TMB显色液
终止液
洗涤液
3. 操作步骤
将标准品和待测样本加入微孔，37℃孵育30-90分钟
洗涤3-5次，拍干
加酶标抗体工作液，37℃孵育60分钟
洗涤，拍干
加TMB显色液，避光反应10-30分钟
加终止液，酶标仪450nm读数
4. 样本处理与保存
血清、血浆、组织匀浆、细胞上清均可检测
避免反复冻融，分装后-20℃或-70℃保存
试剂盒2-8℃保存，标准品和酶标抗体避免冻融
5. 应用领域
用于兔血管生成相关机制研究、疾病模型评估及药物研发。
注意事项
严格按照说明书操作，加样、温育、洗涤需规范，显色避光，终止液加入后及时测定。
主要优点缺点
维度 优势 (Pros) 劣势 (Cons)
检测性能 灵敏度极高，特异性强，结果准确 可能存在交叉反应，易受干扰物影响
操作体验 流程标准化，无需昂贵设备，适合高通量检测 步骤多且繁琐，耗时较长，对操作技巧有要求
经济成本 适合大批量样本检测，长期看性价比尚可 单次试剂成本较高，且不同批次可能存在差异
应用范围 可检测血清、血浆、细胞上清等多种样本 对样本质量（如是否溶血）敏感
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试剂与样本准备阶段
温度平衡（最容易被忽视的点）
操作： 从冰箱取出的试剂盒（包括标准品、酶标试剂、样品等）必须在室温（18-25℃）下平衡 30 分钟。
后果： 冷试剂直接使用会导致孔内温差，产生冷凝水或非特异性背景，严重影响 OD 值。
试剂配制
洗涤液： 浓缩洗涤液如果在低温下保存可能会有结晶析出。配制时必须确保结晶完全溶解并混匀。
现用现配： 酶标试剂和显色液（如 TMB）对光和热敏感，建议在使用前配制工作液，避免失效。
样本处理
避免溶血： 血清样本如果发生溶血（红细胞破裂），会释放过氧化物酶，导致假阳性或背景过高。
离心去杂质： 血液或细胞上清样本在加样前最好进行离心，去除沉淀和悬浮物，防止堵塞孔底或干扰读数。
稀释倍数： 如果样本浓度过高，超出标准曲线范围，必须进行预实验确定稀释倍数。计算结果时记得乘以稀释倍数。
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