产品介绍：
小鼠E-cadherin/CD324/CDH ELISA试剂盒是一种用于定量检测小鼠样本中E-钙粘附分子（E-Cadherin）浓度的科研工具，广泛应用于细胞生物学和分子生物学研究。该试剂盒采用双抗体夹心法，基于酶联免疫吸附检测（ELISA）技术，具有高灵敏度和特异性。
产品名称 | 小鼠E-cadherin/CD324/CDHelisa试剂盒 | 英文名称 | Mouse E-cadherin/CD324/CDH ELISA Kit |
规格 | 48T/96T | 货号 | A129860 |
主要特点
检测原理：双抗体夹心ELISA法。预先包被的抗小鼠E-cadherin抗体与样本中的E-cadherin结合，再加入生物素标记的检测抗体，形成“固相抗体-E-cadherin-酶标抗体”复合物。加入辣根过氧化物酶（HRP）标记的链霉亲和素和显色底物TMB后，颜色深浅与E-cadherin浓度成正比，通过酶标仪在450nm波长下测定吸光度（OD值），绘制标准曲线计算样本浓度。
灵敏度：最低检测浓度可达36 pg/ml，检测范围为156.3 pg/ml - 10000 pg/ml。
样本类型：适用于血清、血浆、细胞培养上清液、组织匀浆等生物液体样本。
特异性：可特异性检测小鼠E-cadherin，与其他类似物无明显交叉反应。
精密度：板内变异系数<10%，板间变异系数<15%。
操作步骤
标准品稀释：按说明书进行梯度稀释。
加样：设置空白孔、标准孔和样本孔，加入相应液体。
温育：封板后37℃温育60分钟。
洗涤：多次洗涤去除未结合物质。
加酶标抗体：加入HRP标记的抗体，避光温育。
显色：加入显色底物，避光显色15分钟。
终止：加入终止液终止反应。
测定：酶标仪在450nm波长下测定OD值，计算浓度。
注意事项
样本处理：避免溶血和反复冻融，确保样本质量。
试剂保存：试剂盒需在2-8℃避光保存，避免污染。
操作规范：使用一次性枪头，避免交叉污染；加样时避免触及孔壁。
所有样品、洗涤液和废弃物都应按传染物处理。
主要优点缺点
维度 优势 (Pros) 劣势 (Cons)
检测性能 灵敏度极高，特异性强，结果准确 可能存在交叉反应，易受干扰物影响
操作体验 流程标准化，无需昂贵设备，适合高通量检测 步骤多且繁琐，耗时较长，对操作技巧有要求
经济成本 适合大批量样本检测，长期看性价比尚可 单次试剂成本较高，且不同批次可能存在差异
应用范围 可检测血清、血浆、细胞上清等多种样本 对样本质量（如是否溶血）敏感
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试剂与样本准备阶段
温度平衡（最容易被忽视的点）
操作： 从冰箱取出的试剂盒（包括标准品、酶标试剂、样品等）必须在室温（18-25℃）下平衡 30 分钟。
后果： 冷试剂直接使用会导致孔内温差，产生冷凝水或非特异性背景，严重影响 OD 值。
试剂配制
洗涤液： 浓缩洗涤液如果在低温下保存可能会有结晶析出。配制时必须确保结晶完全溶解并混匀。
现用现配： 酶标试剂和显色液（如 TMB）对光和热敏感，建议在使用前配制工作液，避免失效。
样本处理
避免溶血： 血清样本如果发生溶血（红细胞破裂），会释放过氧化物酶，导致假阳性或背景过高。
离心去杂质： 血液或细胞上清样本在加样前最好进行离心，去除沉淀和悬浮物，防止堵塞孔底或干扰读数。
稀释倍数： 如果样本浓度过高，超出标准曲线范围，必须进行预实验确定稀释倍数。计算结果时记得乘以稀释倍数。
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