小鼠OPG/TNFRSF11Belisa试剂盒
产品简介:
小鼠OPG/TNFRSF11B ELISA试剂盒是一种用于定量检测小鼠血清、血浆、细胞培养上清液及组织匀浆等样本中骨保护素（OPG，又称TNFRSF11B）浓度的高灵敏度免疫分析工具，广泛应用于骨代谢、免疫调节及相关疾病等科研领域。
英文名称 | Mouse OPG/TNFRSF11B ELISA Kit | 产品类别 | Mouse/小鼠Elisa试剂盒 |
货号 | A129895 | 规格 | 48T/96T |
核心特点
检测原理：采用双抗体夹心法（Sandwich ELISA）。预包被抗小鼠OPG/TNFRSF11B特异性抗体，样本中的OPG与抗体结合后，加入生物素标记的检测抗体和酶标亲和素，形成免疫复合物。加入显色底物（如TMB）后，颜色深浅与OPG浓度成正相关。
灵敏度与检测范围：灵敏度可达5 pg/ml～10 pg/ml，检测范围宽（如93.8 pg/ml～6000 pg/ml或更大，依品牌而异）。
样本类型：血清、血浆（EDTA等抗凝剂）、细胞上清、组织匀浆等多种生物液体均可检测。
特异性与重复性：不与其它细胞因子发生交叉反应，批内和批间变异系数低（<10-15%），结果准确可靠。
主要组成
预包被抗体的微孔板（96孔/48孔）
生物素化检测抗体
酶标亲和素（HRP-Streptavidin）
标准品（冻干或液体，用于标准曲线）
洗涤液、显色液、终止液
样品稀释液、封板膜等
操作步骤（简要）
加样：标准品和待测样本加入微孔，37℃孵育一定时间；
洗涤：洗板3-5次，去除未结合物质；
加检测抗体：加入生物素化抗体，37℃孵育；
加酶标亲和素：37℃孵育，洗涤；
显色与终止：加入显色液，避光显色，终止反应；
读数：酶标仪450 nm测定吸光度，根据标准曲线计算浓度。
保存与注意事项
试剂盒保存：2-8℃冷藏，避免冻融和阳光直射，开封后尽快使用。
样本处理：血清/血浆样本需离心分离，组织样本需匀浆离心，避免溶血和高血脂样本。
操作建议：严格按照说明书进行，避免交叉污染，不同批号试剂不可混用。
注意事项
严格按照说明书操作，避免交叉污染和非特异性结合。
样本避免反复冻融，未用完的板条密封冷藏（2-8℃）保存。
试剂盒组分不可混用，标准品建议一次性使用。
血浆、血清及组织样本需规范处理，避免溶血和杂质干扰。
该试剂盒具有灵敏度高、特异性强、重复性好的特点，是兔MIP-3α/CCL20定量检测及相关疾病机制研究的可靠工具，广泛应用于兔免疫、炎症、感染等领域的科研。
常见问题解答 (FAQ)
Q1: 为什么要做“复孔”？
A: 建议每个样本（包括标准品）都做复孔（2-3个孔）。这样可以计算平均值，减少操作误差，提高数据的可信度。
Q2: 样本需要稀释吗？
A: 是的。如果样本浓度过高，超出了标准曲线的检测范围，需要根据预实验结果进行适当稀释。计算最终浓度时，记得乘以稀释倍数。
Q3: 结果出现“花板”（背景不均）怎么办？
A: 可能原因包括：洗板不干净、温育温度不均、加样时产生气泡、或者试剂（如底物）受光照分解。请检查洗板机是否堵塞，确保温育箱温度恒定。
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如何验证试剂盒的特异性？（实操建议）：
稀释线性实验 (Linearity)：
操作： 将高浓度的阳性样本用稀释液进行梯度稀释（如1:2, 1:4, 1:8...）。
预期： 测得的浓度值与稀释倍数应呈良好的线性关系（相关系数 R² ≥ 0.98）。如果线性不好，说明样本基质中有干扰物影响了特异性结合。
干扰实验 (Interference Test)：
操作： 在已知浓度的目标抗原溶液中，加入高浓度的潜在干扰物（如高浓度的脂质或结构类似物），检测其对结果的影响。
预期： 若检测值与理论值偏差在±10%以内，说明抗干扰能力强，特异性好。
回收实验 (Recovery Test)：
操作： 在样本中加入已知量的标准品，检测总含量，计算回收率。
预期： 回收率在80%-120%之间，说明试剂盒能准确识别目标，不受样本背景干扰。
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