产品介绍:

产品特点
高灵敏度:最低检测限可达0.1-0.938 ng/mL,能够检测低浓度的抗卵清蛋白IgE抗体。
高特异性:试剂盒中的抗体经过优化,可特异性识别抗卵清蛋白IgE抗体,减少交叉反应。
操作简便:试剂盒包含预包被微孔板、标准品、酶标抗体等必要组分,简化了实验步骤。
适用样本
血清、血浆、细胞培养上清、组织匀浆及相关液体样本。
产品名称 | 小鼠抗卵清蛋白IgE抗体(OVAIgE)ELISA试剂盒 | 英文名称 | Mouse OVAIgE ELISA |
规格 | 48T/96T | 货号 | A117320 |

检测原理

双抗体夹心法:微孔板包被抗小鼠IgE抗体,样本中的抗卵清蛋白IgE抗体与之结合,再与生物素标记的卵清蛋白结合,最后通过HRP标记的链霉亲和素显色,颜色深浅与抗体浓度成正比。
间接法:微孔板包被卵清蛋白,样本中的抗卵清蛋白IgE抗体与之结合,再与HRP标记的二抗结合,显色后通过酶标仪测定吸光度。
试剂盒组成
预包被微孔板:96孔或48孔板,已包被捕获抗体。
标准品:已知浓度的抗卵清蛋白IgE抗体标准品。
酶标抗体:HRP标记的检测抗体。
洗涤液、底物液、终止液:用于洗涤和显色反应。
检测步骤

标准品稀释:按说明书稀释标准品,制备不同浓度的标准溶液。
加样:在微孔板中加入标准品和样本,设置空白对照孔。
温育:封板后于37℃温育,使抗体与抗原充分结合。
洗涤:弃去液体,用洗涤液多次洗涤,去除未结合物质。
加酶:加入酶标抗体,再次温育和洗涤。
显色:加入底物液,显色后加入终止液终止反应。
测定:使用酶标仪在450nm波长下测定吸光度,通过标准曲线计算样本浓度。
注意事项
样本处理:避免使用含的样本,防止抑制HRP活性。
保存条件:试剂盒需在2-8℃保存,有效期6个月。
操作规范:严格按照说明书操作,确保实验结果的准确性。
主要优点缺点

维度 优势 (Pros) 劣势 (Cons)
检测性能 灵敏度极高,特异性强,结果准确 可能存在交叉反应,易受干扰物影响
操作体验 流程标准化,无需昂贵设备,适合高通量检测 步骤多且繁琐,耗时较长,对操作技巧有要求
经济成本 适合大批量样本检测,长期看性价比尚可 单次试剂成本较高,且不同批次可能存在差异
应用范围 可检测血清、血浆、细胞上清等多种样本 对样本质量(如是否溶血)敏感
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试剂与样本准备阶段

温度平衡(最容易被忽视的点)
操作: 从冰箱取出的试剂盒(包括标准品、酶标试剂、样品等)必须在室温(18-25℃)下平衡 30 分钟。
后果: 冷试剂直接使用会导致孔内温差,产生冷凝水或非特异性背景,严重影响 OD 值。
试剂配制
洗涤液: 浓缩洗涤液如果在低温下保存可能会有结晶析出。配制时必须确保结晶完全溶解并混匀。
现用现配: 酶标试剂和显色液(如 TMB)对光和热敏感,建议在使用前配制工作液,避免失效。
样本处理
避免溶血: 血清样本如果发生溶血(红细胞破裂),会释放过氧化物酶,导致假阳性或背景过高。
离心去杂质: 血液或细胞上清样本在加样前最好进行离心,去除沉淀和悬浮物,防止堵塞孔底或干扰读数。
稀释倍数: 如果样本浓度过高,超出标准曲线范围,必须进行预实验确定稀释倍数。计算结果时记得乘以稀释倍数。
关键字: 小鼠;OVAIgE ;ELISA试剂盒;
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