产品介绍:
禽网状内皮组织增殖病病毒(REV)核酸检测试剂盒(荧光PCR法)是一种专门用于检测禽网状内皮组织增殖病病毒(Reticuloendotheliosis Virus, REV)核酸的分子诊断工具。
禽网状内皮组织增殖病病毒属于逆转录病毒科,主要侵害鸡、火鸡、鸭等禽类的免疫系统,可导致禽群生长迟缓、免疫抑制,甚至诱发淋巴瘤。由于REV常与其他禽病(如马立克氏病、禽白血病)混合感染,且部分疫苗株存在基因组整合风险,因此精准的核酸检测对于临床诊断和疫苗质量控制至关重要。
产品名称 | 禽网状内皮组织增殖病病毒(REV)核酸检测试剂盒(荧光PCR法) |
产品分类 | 荧光PCR |
规格 | 50T |
货号 | AP3623 |
以下是关于该试剂盒的详细介绍:
1. 检测原理与技术
该试剂盒主要基于TaqMan探针法实时荧光定量PCR(qPCR)技术。
核心机制:
样本处理:从病禽的脾脏、肝脏、法氏囊、肿瘤组织或全血中提取DNA(用于检测前病毒DNA)或RNA(用于检测病毒载量)。
荧光PCR扩增:针对REV基因组中高度保守的区域(通常是LTR长末端重复序列、gag基因或pol基因)设计特异性引物和探针。
信号检测:在PCR扩增过程中,随着目的片段的指数级扩增,荧光信号也随之增强,仪器实时监测荧光变化,从而实现对病原体的定性或定量分析。
优势:相比病毒分离(耗时长)和ELISA(检测抗体而非病毒),荧光PCR法具有高灵敏度(可检测单拷贝病毒)、高特异性(区分REV与其他逆转录病毒)和快速(2小时内出结果)的优势。
2. 试剂盒特点与性能
这类试剂盒专为禽病防控设计,具有以下显著特点:
性能维度 描述
特异性 极高。引物和探针专门针对REV设计,通常不会与禽流感病毒(AIV)、新城疫病毒(NDV)、马立克氏病病毒(MDV)等发生交叉反应。
灵敏度 极高。最低检测限通常可达 10~100 copies/μL,能有效检测出潜伏感染或低载量感染的鸡群。
临床价值 鉴别诊断。用于区分REV引起的免疫抑制与MDV(马立克氏病)引起的肿瘤病变。
应用场景 适用于临床疑似病例的辅助诊断、种禽场净化监测、禽用疫苗(如禽痘疫苗)外源病毒检测等。
3. 适用样本与应用场景
适用样本:
组织样本:脾脏、肝脏、法氏囊、肿瘤组织(病死禽)。
液体样本:全血、血清、羽髓(活禽监测)。
疫苗制品:用于检测禽痘疫苗等是否污染REV。
应用场景:
临床诊断:对出现生长停滞、消瘦、贫血或淋巴瘤症状的禽群进行确诊。
疫苗安全检测:由于REV基因组易整合至禽痘病毒疫苗中,该试剂盒常用于SPF鸡群及生物制品的外源病毒检验。
科研研究:研究REV的致病机制、流行病学调查及基因整合现象。
4. 操作注意事项
防污染:荧光PCR极其灵敏,必须严格分区操作(试剂准备区、样本处理区、扩增区),移液器需带滤芯吸头,防止气溶胶污染。
样本处理:
组织样本需充分研磨匀浆,离心取上清液进行核酸提取。
由于REV是逆转录病毒,若检测RNA需注意防止降解(使用RNase抑制剂)。
结果解读:
阳性:扩增曲线呈S型,且Ct值小于设定的阈值,提示样本中含有REV核酸。
阴性:无扩增曲线,或Ct值大于阈值。若内标未起峰,则结果无效,需重做。
总结:禽网状内皮组织增殖病病毒核酸检测试剂盒(荧光PCR法)是现代养禽业进行疫病净化和疫苗质量控制的关键工具。它通过分子诊断技术,解决了传统方法难以检测潜伏感染和基因整合的难题,为养禽业的生物安全提供了有力保障。
PCR试剂盒的核心类型:
1. 常规PCR试剂盒
原理:通过引物扩增目标DNA片段,产物经琼脂糖电泳检测。
特点:操作简单、成本低,适用于定性检测(如牛疱疹病毒1型PCR试剂盒)。
典型应用:动物病原体筛查。
2. 荧光定量PCR(qPCR)试剂盒
探针法(TaqMan):
利用特异性探针结合目标序列,荧光信号实时监测扩增过程。
优势:高特异性(如牛白血病病毒试剂盒)、宽线性范围(10²–10⁷拷贝/μL)。
染料法(SYBR Green):
染料嵌入双链DNA发光,成本较低,但需优化引物特异性。
3. 恒温扩增试剂盒
技术:LAMP、RPA等,无需热循环仪,适合现场检测。
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关键字: 禽网状内皮组织增殖病病毒;REV ;检测试剂盒;荧光PCR;
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