大豆胰蛋白酶抑制因子检测原理
大豆胰蛋白酶抑制因子检测试剂盒采用间接竞争 ELISA 方法,在酶标板微孔条上预包被大豆胰蛋白酶抑制因子(KTI)抗原,样本中的大豆胰蛋白酶抑制因子和预包被的抗原竞争 KTI抗体,加入酶标二抗后,用 TMB 底物显色,样本吸光度值与其所含大豆胰蛋白酶抑制因子的含量呈负相关,与标准曲线比较即可得出样本中大豆胰蛋白酶抑制因子的含量。
大豆胰蛋白酶抑制因子检测样本类型
大豆及其深加工产品(如:豆粕、发酵豆粕、膨化大豆、大豆分离蛋白、大豆浓缩蛋白等)
胰蛋白酶抑制因子检测试剂盒技术参数
检测范围:0.4mg/g~50mg/g 反应温度:37℃ 反应时间:30min
校准品 1~5 设定浓度分别为:0mg/mL、0.4mg/mL、2mg/mL、10mg/mL、50mg/mL。
样本在前处理过程中稀释了 3000 倍,校准品实际浓度为设定浓度的 1/3000,计算结果无需再乘以稀释倍数
大豆胰蛋白酶抑制因子检测试剂盒试剂盒组成
30×浓缩样本提取液:50mL
大豆胰蛋白酶抑制因子样本稀释液:100mL
20×浓缩洗液:50mL
胰蛋白酶抑制因子检测板:96T
胰蛋白酶抑制因子校准品(1~5):各 1.5mL
胰蛋白酶抑制因子抗体工作液:8mL
胰蛋白酶抑制因子酶标试剂:14mL
显色液:14mL
终止液:14mL
盖板膜 3 张
质检报告 1 份
说明书 1 份
胰蛋白酶抑制因子检测所需材料
酶标仪(450、630nm 滤光片)、天平(感量 0.01g)、粉碎机、60 目筛网、摇床、离心机、洗板机/洗瓶、移液器及枪头(量程 10~100μL 及 100~1000μL)、量筒、50mL 离心管、2mL 离心管、加样槽、吸水纸、计时器、蒸馏水
大豆胰蛋白酶抑制因子检测简易操作步骤
1. 提取:称取样本 0.30g 加 30mL1×样本提取工作液,25℃提取 16h
2. 稀释:4000rpm 离心 5min,用样本稀释液稀释 30 倍,混匀待检
3. 加样:加入校准品/待测样本 50μL,抗体工作液 50μL,37℃孵育 10min
4. 洗板:用 1×洗涤工作液洗板 4 次,拍干
5. 加酶:加入酶标试剂 100μL/孔,37℃孵育 10min
6. 洗板:用 1×洗涤工作液洗板 4 次,拍干
7. 显色:加入显色液 100μL/孔,37℃孵育 10min
8. 终止:加终止液 100μL/孔,酶标仪读数
9. 计算:数据带入计算软件
胰蛋白酶抑制因子检测试剂盒贮藏方法及有效期
2~8℃干燥保存,有效期 12 个月
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