产品概述：
Recombinant Human AG-3（重组人AG-3蛋白）是一种通过基因工程技术生产的科研用蛋白。它对应的人类基因名为AGR3（Anterior Gradient 3），属于 anterior gradient 蛋白家族。
产品名称; Recombinant Human AG-3
别名; AG-3, AG3, Agr3, AGR3_HUMAN, Anterior gradient 3, xenopus, homolog of, Anterior gradient homolog 3, Anterior gradient homolog 3 (Xenopus laevis), anterior gradient protein 3, Anterior gradient protein 3 homolog, BCMP11, Breast cancer membrane protein 11, Gm888, hAG 3, hAG-3, HAG3, OTTHUMP00000158512, PDIA18, Protein disulfide isomerase family A member 18
宿主; E.Coli
表达区间; 22-166
分子量; 15.8 kDa
标签; N-terminal His Tag
纯度; Greater than 95% by SDS-PAGE gel analyses
应用; Western Blot, ELISA
性状; Lyophilized from a 0.2 μm filtered solution in 10 mM Hepes, 500 mM NaCl with 5% trehalose, pH7.4
溶解方法; Centrifuge the vial at 10,000 rpm for 1 minute, reconstitute at 200 μg/ml in sterile distilled water by gentle pipetting 2-3 times, don’t vortex
存储; The lyophilized protein is stable at -20 °C for up to 1 year. For extended storage, it is recommended to further dilute in working aliquots after reconstitution. The protein solution is stable at ≤ -20 °C for 3 months, or 2-7 days at 2-8 °C under sterile conditions.Avoid repeated freeze/thaw cycle.
存储条件：
冻干状态: 存储于-20°C以下，可稳定保存长达12个月。
复溶后: 在2-8°C下可保存1个月，需保持无菌环境。
注意事项: 避免反复冻融，以防止蛋白降解或活性损失。
使用说明：
复溶方法: 使用无菌蒸馏水或PBS缓冲液（pH 7.4）溶解冻干粉，轻轻混匀至完全溶解。
应用建议:
实验用途: 适用于Western Blot、ELISA等检测，作为抗原或标准品。
浓度调整: 根据实验需求稀释，避免高浓度导致非特异性结合。
安全提示: 操作时需佩戴手套和护目镜，遵循实验室生物安全规范。
重组表达原理：
基因克隆：从牛基因组中获取CST3基因的编码序列（对应氨基酸31–148），插入含有启动子、筛选标记和His标签序列的质粒载体。
宿主表达：将重组质粒转化至E. coli（如BL21菌株），在IPTG诱导下启动蛋白表达。该系统成本低、表达效率高，适合大规模生产。
蛋白纯化：利用His标签与镍柱亲和层析结合，实现高纯度（>95%）蛋白回收，再经透析或凝胶过滤去除杂质。
冻干保存：加入海藻糖作为保护剂，冻干后可长期稳定储存，复溶后保持天然构象和生物活性。
操作要点：
电泳条件：使用15% SDS-PAGE凝胶，以提高对小分子量蛋白（~13.4 kDa）的分辨率。
转膜参数：采用湿转法，100 V、60–90分钟（4°C），使用PVDF膜（需甲醇预活化）。
抗体选择：
一抗：抗CST3多克隆抗体（如兔源抗体），推荐稀释比为1:1000。
二抗：HRP标记的山羊抗兔IgG，稀释比1:10,000。
显色方式：ECL化学发光法，预期条带位于~13.4 kDa处。
内参建议：由于CST3分子量较小，可选用GAPDH（~37 kDa）或β-actin（~42 kDa）作为内参，避免条带重叠。
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关键字： AG-3;15.8 kDa ;22-166;
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