重组表达原理:

基因克隆:从牛基因组中获取CST3基因的编码序列(对应氨基酸31–148),插入含有启动子、筛选标记和His标签序列的质粒载体。
宿主表达:将重组质粒转化至E. coli(如BL21菌株),在IPTG诱导下启动蛋白表达。该系统成本低、表达效率高,适合大规模生产。
蛋白纯化:利用His标签与镍柱亲和层析结合,实现高纯度(>95%)蛋白回收,再经透析或凝胶过滤去除杂质。
冻干保存:加入海藻糖作为保护剂,冻干后可长期稳定储存,复溶后保持天然构象和生物活性。
产品概述:

Recombinant Human APRT(人腺嘌呤磷酸核糖转移酶重组蛋白)是一种通过基因工程技术(通常在大肠杆菌中)生产的酶蛋白,主要用于科学研究,以帮助理解其在腺嘌呤代谢 salvage 途径中的作用以及与 2,8-二羟基腺嘌呤(DHA)结石等疾病的关系
产品名称; Recombinant Human APRT
别名; Adenine phosphoribosyltransferase, AMP, AMP diphosphorylase, AMP pyrophosphorylase, APRT, APT_HUMAN, DKFZp686D13177, MGC125856, MGC125857, MGC129961, Transphosphoribosidase
宿主; E.Coli
表达区间; 1-180
分子量; 19.7 kDa
标签; N-terminal His Tag
纯度; Greater than 95% as determined by SDS-PAGE
应用; Western Blot, ELISA
性状; Lyophilized from a 0.2 μm filtered solution in 10 mM Hepes, 500 mM NaCl with 5% trehalose, pH7.4
溶解方法; Centrifuge the vial at 10,000 rpm for 1 minute, reconstitute at 200 μg/ml in sterile distilled water by gentle pipetting 2-3 times, don’t vortex
存储; The lyophilized protein is stable at -20 °C for up to 1 year. For extended storage, it is recommended to further dilute in working aliquots after reconstitution. The protein solution is stable at ≤ -20 °C for 3 months, or 2-7 days at 2-8 °C under sterile conditions.Avoid repeated freeze/thaw cycle.
科研中使用时的注意事项:

如果你是在实验室使用重组蛋白,有几个关键点需要注意:
避免反复冻融:重组蛋白对温度敏感,反复冻融会导致蛋白变性失活。建议收到产品后进行分装保存。
载体蛋白:有些重组蛋白制剂中会添加牛血清白蛋白(BSA)作为保护剂,以提高稳定性。
但在某些特定实验(如动物体内实验)中,如果不想引入外源动物蛋白,就需要选择“无载体”的产品。
活性:重组蛋白的价值在于其“生物活性”,购买时需关注其比活性(Specific Activity)数据。
哪里发挥作用?:

重组蛋白技术是现代生物技术的基石,应用范围极广:
💉 生物制药(核心应用):
治疗药物:比如治疗糖尿病的胰岛素、治疗贫血的促红素、治疗癌症的单克隆抗体、以及血友病治疗用的凝血因子。
疫苗:例如重组新冠疫苗,就是利用重组技术生产病毒的特定蛋白(如RBD蛋白)来激发免疫反应。
最新突破:近期国内在重组人血白蛋白领域取得了重大进展,利用酵母或水稻生产的人血白蛋白已成功完成Ⅲ期临床试验,
这有望替代传统的血浆提取白蛋白,解决来源短缺和安全风险问题。
🔬 科研与诊断:
作为细胞因子或生长因子,用于干细胞培养、细胞诱导分化。
作为抗原或酶,用于开发ELISA试剂盒、化学发光诊断等体外诊断(IVD)产品。
存储条件:

冻干状态: 存储于-20°C以下,可稳定保存长达12个月。
复溶后: 在2-8°C下可保存1个月,需保持无菌环境。
注意事项: 避免反复冻融,以防止蛋白降解或活性损失。
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关键字: APRT;19.7 kDa; 1-180;
上海西格生物有限公司于2019年6月18日成立。
西格生物专注于实验室和公共卫生领域,利用互联网、数据分析及自动化技术,包括实验室固定资产、仪器设备、生物样本、化学品、试剂、配件耗材、环境、仪器自动化和高通量筛选等一体化综合管理平台。不断为各行业实验室细胞生命学产品、技术服务、免疫学和分子学产品,截止至2024年5月,西格生物已为生命科学、检验检测、化工材料、科研院所、政府机构多行业300余家知名客户提供实验室完整解决方案。本着帮助用户实现“让科研场所更智能、让科研人员更专注、让科学服务更高效“的愿景,西格生物将继续在实验室科研产品领域持续发力,更加重视本土化,建构通用性高、适应性好、模块搭配灵活,能快速响应客户需求的产品。