蔓荆子探针法PCR鉴定试剂盒
商品属性
产品名称 | 蔓荆子探针法PCR鉴定试剂盒 | 英文名称 | Fructus Viticis Probe-based PCR Identification Kit |
规格 | 50T | 货号 | PR5037 |
预期用途
本试剂盒基于实时荧光定量PCR技术（TaqMan探针法），用于蔓荆子DNA的定性或定量检测，适用于科研领域（如物种鉴定、遗传分析等），不适用于临床诊断。
产品特点
高灵敏度与特异性：引物和探针针对蔓荆子高度保守序列设计，检测限低至100拷贝/反应，无交叉反应。
即开即用：用户仅需提供样品DNA模板，操作简便。
双重检测模式：支持定性和定量分析，定量线性范围达5个数量级（10^1–10^6拷贝/μL）。
内置对照：提供无传染性DNA片段作为阳性对照，避免假阴性干扰。
兼容性：适配主流荧光定量PCR仪（如ABI、Bio-Rad等）。
规格与组分
| 成分 | 规格 | 包装 |
| 2×Probe qPCR MasterMix | 500 μL | 本色盖离心管 |
| 蔓荆子引物-探针混合液 | 150 μL | 棕色管 |
| 荧光PCR专用模板稀释液 | 1 mL | 绿色盖离心管 |
| 阳性对照（1×10^7拷贝/μL） | 50 μL | 黄色盖离心管 |
| 使用手册 | 1份 | — |
储存与运输
储存条件：-20℃避光保存，有效期12个月。
运输方式：低温运输（冰袋或干冰）。
实验步骤
1. 标准曲线制备（10倍梯度稀释）
标记离心管（6管），依次稀释阳性对照至10^1–10^6拷贝/μL，避免交叉污染。
2. 样品DNA提取
推荐使用商业化DNA提取试剂盒，设置阴性/阳性制备对照（N+2样本）。
3. PCR反应体系（20 μL/反应）
| 成分 | 样品管 | 阴性对照 | 标准曲线管 |
| 2×MasterMix | 10 μL | 10 μL | 各10 μL |
| 引物-探针混合液 | 3 μL | 3 μL | 各3 μL |
| 待测DNA模板 | 7 μL | — | — |
| 超纯水 | — | 7 μL | — |
| 标准品稀释液 | — | — | 各7 μL |
4. PCR扩增程序
| 步骤 | 温度 | 时间 | 循环数 |
| 预变性 | 95℃ | 5 min | 1 |
| 扩增 | 95℃ | 15 sec | 45 |
| 退火/延伸 | 60℃ | 1 min | 45 |
5. 数据分析
定量检测：以Ct值为纵轴、标准品log浓度为横轴绘制标准曲线，计算样本浓度。
定性检测：阳性判定标准为Ct≤35且扩增曲线呈指数增长；Ct≥40为阴性；35<Ct<40需复测。
注意事项
实验分区操作（试剂准备区、样本处理区、扩增区），避免气溶胶污染。
使用带滤芯枪头，每步更换枪头。
反复冻融不超过7次，避免试剂降解。
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