焦槟榔探针法PCR鉴定试剂盒
商品属性
产品名称 | 焦槟榔探针法PCR鉴定试剂盒 | 英文名称 | Semen Arecae Preparata Probe-based PCR Identification Kit |
规格 | 50T | 货号 | PR5076 |
产品概述
本试剂盒基于探针法荧光定量RT-PCR技术，专用于焦槟榔（Semen Arecae Preparata）的定性与定量检测。适用于科研用途，不可用于临床诊断。
规格与成分
试剂一：探针法qRT-PCR缓冲液（500μL）
试剂二：探针法qRT-PCR酶混合液（100μL）
试剂三：荧光PCR专用模板稀释液（1 mL）
试剂四：焦槟榔探针法qRT-PCR引物混合液（100μL）
试剂五：焦槟榔qRT-PCR探针（50μL）
试剂六：阳性对照（1×10⁸拷贝/μL，50μL）
说明书：1份
规格：50次/盒（20μL体系/次）
储存与运输
储存条件：-20℃避光保存，有效期12个月。
运输：低温泡沫箱加冰密封运输，避免反复冻融。
使用方法
1. 标准曲线制备（以10ⁱ⁻10⁶拷贝/μL为例）
标记6管（7至2号），依次稀释阳性对照（10倍梯度），每步换枪头，冰上保存。
2. 样品RNA制备
建议设置N+2个样本（含阳性/阴性对照）。
使用兼容的RNA提取试剂纯化样本，或选用配套提取试剂。
3. qRT-PCR反应（20μL体系）
体系配置：
样品管：10μL缓冲液 + 2μL酶混合液 + 1μL探针 + 2μL引物 + 5μL RNA模板。
阴性对照：以水替代模板。
标准曲线管：加入对应稀释度标准品5μL。
反应程序：
逆转录：50℃ 30 min
预变性：94℃ 10 min
40循环：94℃ 15 sec → 60℃ 1 min（采集FAM信号）
4. 数据分析
定量检测：以标准曲线log浓度-Ct值计算样本拷贝数。
定性检测：Ct≤36为阳性，≥40为阴性；36<Ct<40需复测。
注意事项
分区操作（样本处理、试剂配制、加样），避免交叉污染。
使用带芯枪头，反应液避光保存，彻底离心混匀。
阳性对照单独存放，严禁污染其他组分。
实验后以10%次氯酸或75%酒精消毒工作台。
性能参数
灵敏度：检测下限≤10拷贝/μL。
特异性：引物针对保守区设计，无交叉反应。
线性范围：10¹⁻10⁶拷贝/μL（R²≥0.99）。
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