多瘤病毒探针法荧光定量PCR试剂盒
商品属性
产品名称 | 多瘤病毒探针法荧光定量PCR试剂盒 | 英文名称 | Polyomavirus Probe-based Real-time PCR Kit |
规格 | 50T | 货号 | PR5284 |
产品概述
本试剂盒基于TaqMan探针法实时荧光定量PCR（qPCR）技术，用于特异性检测多瘤病毒基因组保守区域（如VP1衣壳蛋白基因或大T抗原基因）。通过标记荧光报告基团（FAM）和淬灭基团的探针，在PCR延伸阶段释放荧光信号，实现高灵敏度、高特异性的病毒DNA定量检测。
产品关键特性
高特异性：优化的引物和探针仅靶向多瘤病毒，避免与人类基因组或其他病原体交叉反应。
高灵敏度：检测下限达10²–10³拷贝/μL，适用于早期或潜伏感染检测。
即开即用：预混2×qPCR MagicMix（含缓冲液、酶、dNTPs等），用户仅需添加模板DNA及引物探针。
质控设计：
提供无传染性阳性对照（质粒DNA片段），排除假阴性。
可选UNG酶防污染系统，降解残留扩增产物。
适用范围：临床样本（血液、尿液、脑脊液）、移植监测、兽医检测及科研。
技术参数
| 项目 | 参数说明 |
| 规格 | 50次反应（50T） |
| 保存条件 | -20℃避光，避免反复冻融 |
| 有效期 | 12个月 |
| 检测通道 | FAM（报告基团） |
| 阳性对照 | 1×10⁸拷贝/μL（非活病毒片段） |
检测流程
样本处理：
采集全血、尿液或组织，无菌操作防止污染。
使用商品化DNA提取试剂盒纯化模板。
反应体系配置（20μL体系）：
2×qPCR Mix 10μL + 引物/探针混合液 3μL + 模板DNA 5μL + 超纯水 2μL。
设置阴性对照（水）和阳性对照（试剂盒提供）。
扩增程序：
预变性：95℃ 10分钟 → 循环反应（40次）：95℃ 15秒 → 60℃ 1分钟（采集荧光）。
结果判读：
定量分析：通过标准曲线计算病毒载量（Ct值≤35为阳性）。
定性分析：Ct值35–40需复测，＞40判为阴性。
注意事项
分区操作：严格区分试剂准备区、样本处理区及扩增区，避免交叉污染。
阳性对照：高浓度对照需独立操作，使用带滤芯枪头。
样本抑制物：血液/组织样本需充分纯化DNA，避免肝素等抑制剂影响。
适用范围：仅限科研使用，不可用于临床诊断。
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