产品原理
本试剂盒基于实时荧光定量PCR（qRT-PCR）技术，采用探针法检测赤芍特异性基因序列。探针5'端标记荧光报告基团（如FAM），3'端标记淬灭基团。当Taq酶在扩增过程中切割探针时，报告基团与淬灭基团分离，释放荧光信号，通过实时监测荧光强度实现靶序列的定性与定量分析。
产品名称 | 赤芍探针法PCR鉴定试剂盒 | 英文名称 | Radix Paeoniae Rubra Probe-based PCR Identification Kit |
产品规格 | 50T | 产品分类 | 荧光定量PCR |
检测类型 | PCR检测 | 产品货号 | PR5167 |
产品特点
高灵敏度与特异性：引物及探针针对赤芍高度保守区设计，无交叉反应。
即开即用：预混缓冲液、酶混合液及优化试剂，仅需提供样品RNA模板。
双重质控：含阳性对照（1×10⁸拷贝/μL）及阴性对照，确保结果可靠性。
适用范围：科研用途，不可用于临床诊断。
试剂盒组成
| 成分 | 规格 | 功能 |
| 探针法qRT-PCR缓冲液 | 500μL | 提供反应体系基础环境 |
| 探针法qRT-PCR酶混合液 | 100μL | 含逆转录酶及Taq DNA聚合酶 |
| 荧光PCR专用模板稀释液 | 1mL | 标准品稀释及样品制备 |
| 赤芍qRT-PCR引物混合液 | 100μL | 特异性扩增靶序列 |
| 赤芍qRT-PCR探针 | 50μL | 荧光信号释放 |
| 阳性对照（1×10⁸拷贝/μL） | 50μL | 标准曲线建立及质控 |
实验步骤
1. 标准曲线制备
将阳性对照按10倍梯度稀释（10²~10⁷拷贝/μL），分装至标记管中，冰上保存备用。
2. RNA提取
使用兼容的RNA提取试剂盒纯化样品RNA，建议设置阳性/阴性提取对照。
3. qRT-PCR反应体系（20μL）
| 成分 | 体积（μL） |
| 缓冲液 | 10 |
| 酶混合液 | 2 |
| 探针 | 1 |
| 引物混合液 | 2 |
| 样品RNA/标准品/对照 | 5 |
4. 反应程序
| 步骤 | 温度 | 时间 |
| 逆转录 | 50℃ | 30 min |
| 预变性 | 94℃ | 10 min |
| 扩增（40循环） | 94℃ 15 sec → 60℃ 1 min（采集FAM信号） |
数据分析
定量分析：以标准曲线log值为横轴、Ct值为纵轴，计算样品浓度。
定性分析：
阳性：Ct≤35，扩增曲线呈典型S型；
阴性：Ct≥40；
可疑（35<Ct<40）：需复测确认。
注意事项
操作需在独立洁净区域进行，避免交叉污染。
试剂解冻后需涡旋混匀，短暂离心后使用。
废弃处理需符合生物安全规范。
声明：本产品仅限科研使用。
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