开心果源性成分探针法荧光定量PCR试剂盒
商品属性
产品名称 | 开心果源性成分探针法荧光定量PCR试剂盒 | 英文名称 | Pistachio-derived Component Probe-based Real-time PCR Kit |
规格 | 50T | 货号 | PR5306 |
预期用途
本试剂盒基于TaqMan探针法荧光定量PCR技术，用于食品或其他材料中开心果源性成分的定性与定量检测。适用于食品安全监管、过敏原筛查及科研领域，不适用于临床诊断。
检验原理
探针法原理：
探针5'端标记荧光报告基团，3'端标记淬灭基团。
PCR扩增时，Taq酶的5'→3'外切酶活性切割探针，释放荧光信号，信号强度与靶序列含量成正比。
定量分析：通过标准曲线（10²~10⁷拷贝/μL）计算待测样本中开心果源性成分的拷贝数。
产品特点
高灵敏度：引物及探针针对开心果保守基因区域设计，检测限低至10²拷贝/μL。
高特异性：无与其他植物或病原体的交叉反应。
即开即用：预混缓冲液、酶及引物探针混合物，仅需提供DNA模板。
双对照系统：含阳性质控品（1×10⁸拷贝/μL）和阴性质控品，确保结果可靠性。
试剂组成
| 成分 | 规格 |
| qPCR缓冲液 | 500μL |
| 酶混合液 | 100μL |
| 引物混合液 | 100μL |
| TaqMan探针 | 50μL |
| 阳性质控品 | 50μL（1×10⁸拷贝/μL） |
| 模板稀释液 | 1mL |
| 说明书 | 1份 |
储存与运输
保存条件：-20℃避光保存，避免反复冻融（≤7次）。
有效期：12个月。
适用仪器
兼容ABI 7500、Bio-Rad CFX96、LightCycler 480等主流荧光定量PCR仪。
自备耗材
无核酸酶离心管（0.2mL/1.5mL）、滤芯吸头（10/200/1000μL）。
核酸提取试剂（推荐柱式提取法）。
操作步骤
标准曲线制备（独立区域操作）：
将阳性质控品10倍梯度稀释（10⁷~10²拷贝/μL），分装至标记管中。
样本DNA提取：
使用商品化试剂盒提取样本DNA，建议浓度≥10ng/μL。
PCR反应体系配制（20μL/反应）：
| 组分 | 体积 |
| qPCR缓冲液 | 10μL |
| 酶混合液 | 2μL |
| 引物混合液 | 2μL |
| TaqMan探针 | 1μL |
| DNA模板 | 5μL |
扩增程序：
| 步骤 | 温度 | 时间 |
| 逆转录 | 50℃ | 30 min |
| 预变性 | 94℃ | 10 min |
| 扩增（40循环） | 94℃ 15 sec → 60℃ 1 min（采集FAM信号） |
结果分析
定量：以标准曲线log值为横轴、Ct值为纵轴，计算样本浓度。
定性：阴性对照Ct≥40，阳性对照Ct≤35为有效。
注意事项
分区操作（试剂配制、样本处理、扩增区），避免污染。
阳性质控品需最后加入，防止气溶胶污染。
本产品仅限科研使用。
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