产品原理
基于实时荧光定量PCR（qPCR）技术，通过探针法特异性检测荜茇RNA。探针5'端标记荧光报告基团，3'端标记淬灭基团。PCR扩增时，Taq酶切割探针，释放荧光信号，通过荧光强度变化定量分析目标序列。
产品名称 | 荜茇探针法PCR鉴定试剂盒 | 英文名称 | Fructus Piperis Longi Probe-based PCR Identification Kit |
产品规格 | 50T | 产品分类 | 荧光定量PCR |
检测类型 | PCR检测 | 产品货号 | PR5186 |
产品特点
高灵敏度：可检测低至10拷贝的靶序列。
高特异性：引物及探针针对荜茇保守区设计，避免交叉反应。
即开即用：预混缓冲液、酶、引物及探针，仅需提供样品RNA模板。
内置对照：含阳性对照（1×10<sup>8</sup>拷贝/μL），便于排除假阴性。
试剂盒组成
| 成分 | 规格 |
| 探针法qRT-PCR缓冲液 | 500μL |
| 探针法qRT-PCR酶混合液 | 100μL |
| 荧光PCR专用模板稀释液 | 1 mL |
| 荜茇探针法引物混合液 | 100μL |
| 荜茇qRT-PCR探针 | 50μL |
| 阳性对照（1×10<sup>8</sup>拷贝/μL） | 50μL |
| 说明书 | 1份 |
实验步骤
1. 标准曲线制备（6个梯度稀释，10<sup>2</sup>–10<sup>7</sup>拷贝/μL）：
使用阳性对照按10倍梯度稀释，独立操作避免污染。
2. 样品RNA提取：
建议设置阴性对照（水）和阳性对照（试剂盒提供）。
3. qPCR反应体系（20μL）：
| 成分 | 体积 |
| qRT-PCR缓冲液 | 10μL |
| 酶混合液 | 2μL |
| 探针 | 1μL |
| 引物混合液 | 2μL |
| 模板RNA | 5μL |
4. 反应程序：
逆转录：50℃ 30分钟
预变性：94℃ 10分钟
扩增（40循环）：94℃ 15秒 → 60℃ 1分钟（采集FAM通道信号）
数据分析
定量分析：以标准曲线log值为横轴、Ct值为纵轴，计算样品浓度。
定性分析：
阳性：Ct ≤ 35，扩增曲线呈S型。
阴性：Ct ≥ 40或无扩增。
可疑结果（35 < Ct < 40）：需重复检测。
注意事项
操作需在无核酸污染环境下进行，建议使用带滤芯枪头。
阳性对照需最后加入，避免污染其他组分。
本产品仅限科研用途。
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