产品概述
本试剂盒采用实时荧光定量PCR(qPCR)探针法技术,专用于白芷(Radix Angelicae Dahuricae)的快速、高特异性分子鉴定。试剂盒包含预混反应体系,适用于DNA模板的定性及定量分析,具有高灵敏度(检测下限达1×10^2拷贝/μL)和特异性(针对白芷保守基因序列设计),可有效避免交叉反应。
产品名称
白芷探针法PCR鉴定试剂盒
英文名称
Radix Angelicae Dahuricae Probe-based PCR Identification Kit
产品规格
50T
产品分类
荧光定量PCR
检测类型
PCR检测
产品货号
PR5196
产品组成
探针法qRT-PCR缓冲液(500 μL)
探针法qRT-PCR酶混合液(100 μL)
荧光PCR专用模板稀释液(1 mL)
白芷特异性引物混合液(100 μL)
白芷qPCR探针(50 μL,FAM标记)
阳性对照(1×10^8拷贝/μL,50 μL)
说明书(1份)
保存条件
-20℃避光保存,有效期12个月。避免反复冻融,运输需低温条件。
实验流程
标准曲线制备
将阳性对照按10倍梯度稀释(10^7~10^2拷贝/μL),每个梯度单独操作以避免污染。
样本制备
提取待测样本DNA(推荐柱式提取法),建议设置阴/阳性质控(水及阳性对照稀释液)。
反应体系配置(20 μL/反应)
| 成分 | 体积(μL) |
| qRT-PCR缓冲液 | 10 |
| 酶混合液 | 2 |
| 探针 | 1 |
| 引物混合液 | 2 |
| 模板DNA/标准品/对照 | 5 |
PCR程序
逆转录:50℃ 30 min(若检测RNA);预变性:94℃ 10 min;扩增:40循环(94℃ 15 sec → 60℃ 1 min,采集FAM信号)。
数据分析
定量分析:以标准品log拷贝数为横轴、Ct值为纵轴绘制曲线,计算样本浓度。
定性判定:阴性对照Ct≥40;阳性对照Ct≤36且有典型扩增曲线;样本Ct≤36判为阳性,≥40为阴性,36~40需复测。
注意事项
分区操作(样本处理、试剂配制、扩增区),避免气溶胶污染。
使用无核酸酶耗材,反应体系避光配制。
探针避光保存,避免反复冻融。
本产品仅限科研用途。
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