牛源性成分探针法荧光定量PCR试剂盒
商品属性
产品名称 | 牛源性成分探针法荧光定量PCR试剂盒 | 英文名称 | Bovine-derived Component Probe-based Real-time PCR Kit |
规格 | 50T | 货号 | PR5342 |
预期用途
检测食品、生物样本（如血液、组织、粪便等）中的牛源性DNA（黄牛、水牛、牦牛）。
适用于食品真伪鉴定、过敏原筛查及科研用途，不可用于临床诊断。
产品特点
高灵敏度：可检测低至几百拷贝/反应的DNA。
高特异性：引物基于牛源性基因保守序列设计，无交叉反应。
即开即用：用户仅需提供DNA模板，操作流程简化。
多重质控：含阳性质控品（定量标准曲线）和阴性质控品（排除污染）。
兼容性广：适配ABI、Bio-Rad、LightCycler等主流荧光定量PCR仪。
试剂盒组分
| 组分名称 | 规格/数量 |
| 牛源性成分扩增液 | 25μL×1管 |
| 牛源性成分反应液 | 975μL×1管 |
| 阳性质控品（1×10^8拷贝/μL） | 50μL×1管 |
| 阴性质控品 | 50μL×1管 |
| 说明书 | 1份 |
注：不同批号组分不可混用，避免反复冻融（≤7次）。
操作步骤
1. 样本前处理
使用商品化DNA提取试剂盒（如Hypure病毒基因组DNA提取试剂盒）或实验室自提方法，确保DNA纯度（A260/A280≈1.8-2.0）。
2. 试剂配制（20μL/反应）
| 试剂 | 体积（每反应） |
| 牛源性成分反应液 | 19.5μL |
| 牛源性成分扩增液 | 0.5μL |
| DNA模板 | 5μL（≤200ng） |
3. PCR程序设置
预变性：95℃ 5分钟；
循环：95℃ 15秒 → 60℃ 60秒（40个循环），于60℃采集荧光信号（FAM通道）。
4. 结果分析
标准曲线：以阳性质控品拷贝数（10^2-10^7拷贝/μL）为横坐标，Ct值为纵坐标，要求R²≥0.98。
判定标准：
阳性：Ct值≤30；
可疑：30<Ct值<35（需复测）；
阴性：Ct值≥35或无信号。
注意事项
分区操作：样本处理、试剂配制、扩增需在独立区域进行，使用滤芯吸头。
保存条件：-20℃避光保存，运输需冰袋（2-8℃）。
质量控制：
阴性对照无Ct值，阳性对照Ct值20-30为有效实验。
避免试剂反复冻融或长时间室温暴露。
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