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品牌:MedChemExpress (MCE)
货号:HY-K1014
中文名称:PolyFast 转染试剂
存储条件:-20°C,2年。避免反复冻融
产品活性:MCE PolyFast 转染试剂采用非脂质体阳离子聚合物为主要成分,可高效地对 DNA、RNA 进行转染。
生物活性:MCE PolyFast 转染试剂采用非脂质体阳离子聚合物为主要成分,适用于 DNA、RNA 的转染。其具体原理为外源 DNA、RNA 可以与转染试剂形成稳定复合物,通过胞吞作用进入细胞,随后在胞质中释放。PolyFast 转染试剂对多种常见细胞具有高水平转染效率,对原代细胞和难转染细胞也具有较好的效果,高效低毒、操作简便、重复性好
描述及优势:
MCE PolyFast 转染试剂采用非脂质体阳离子聚合物为主要成分,适用于 DNA、RNA 的转染。其具体原理为外源 DNA、RNA 可以与转染试剂形成稳定复合物,通过胞吞作用进入细胞,随后在胞质中释放。PolyFast 转染试剂对多种常见细胞具有高水平转染效率,对原代细胞和难转染细胞也具有较好的效果,高效低毒、操作简便、重复性好
操作流程:1. 准备待转染细胞(以 6 孔板为例) 1.1 提前一天接种细胞,至细胞密度达到 70-90% 进行细胞转染。 注:细胞状态会极大影响转染效率,待转染细胞应处于良好生长状态,建议使用生长处于指数期、存活率大于 90% 的细胞进行转染。 1.2 吸去原培养基,用 1× PBS 洗涤细胞 2-3 次,加入 900 μL 新鲜无血清培养基。 2. 准备转染试剂/DNA 复合物 2.1 参照表 1 (见说明书)对 PolyFast 转染试剂进行稀释,对于待转染 6 孔板中的每孔细胞,取 50 μL 无血清培养基与 3 μL PolyFast 转染试剂混合,用枪轻轻吹打混匀,室温反应 5 分钟。 2.2 参照表 1 (见说明书)对 DNA 进行稀释,对于待转染 6 孔板中的每孔细胞,取 50 μL 无血清培养基与 1 μg DNA 混合,用枪轻轻吹打混匀,室温反应 5 分钟。 2.3 将上述稀释好的 PolyFast 转染试剂与 DNA 轻轻混匀,得到 PolyFast 转染试剂/DNA 复合物,室温孵育 15 分钟。 3. 加入 PolyFast 转染试剂/DNA 复合物至细胞 将上述 PolyFast 转染试剂/DNA 复合物加入每孔细胞(复合物占每孔总体积约 1/10),轻轻混匀后于 37℃ 孵育 24-48 小时。必要时,可在转染 6 小时后更换新鲜有血清培养基。 注:1) 通常情况下,DNA (μg) 和 PolyFast 转染试剂 (μL) 的用量比例为 1:3。如有必要,可在 1:1-1:5 的范围内调整以优化转染效果。最佳转染条件因不同的细胞类型和培养条件而有所区别,转染前,可做预实验摸索最佳转染比例。 2) RNA 转染操作可参考 DNA 转染方法进行。 4. 分析转染细胞 转染细胞培养 24-48 小时后,可根据实际情况用荧光检测法、Western Blot、ELISA 等检测转染效果,或加入筛选药物进行稳定细胞株的筛选。
详情参考:www.medchemexpress.cn/inhibitor-kit/polyfast-transfection-reagent.html
品牌介绍:• MCE (MedChemExpress) 拥有200 多种全球独家化合物库,我们致力于为全球科研客户提供前沿最全的高品质小分子活性化合物;• 50,000 多种高选择性抑制剂、激动剂涉及各热门信号通路及疾病领域;• 产品种类涵盖各种重组蛋白,多肽,常用试剂盒 ,更有 PROTAC、ADC 等特色产品,广泛应用于新药研发、生命科学等科研项目;• 提供虚拟筛选,离子通道筛选,代谢组学分析检测分析,药物筛选等专业技术服务;• 设有专业的实验中心和严格的质控、验证体系;• 提供 LC/MS、NMR、HPLC、手性分析、元素分析等各项质检报告,确保产品的高纯度、高品质;• 产品的生物活性多经各国客户实验验证;• Nature, Cell, Science 等多种顶级期刊及制药专利收录了MCE客户的科研成果;• 专业团队跟踪最新的制药及生命科学研究进展,为您提供全球最新的活性化合物;• 与世界各大制药公司及知名科研机构建立了长期的合作。
MCE(MedChemExpress)
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