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品牌:MedChemExpress (MCE)
货号:HY-K2006
产品活性:灵敏 ECL 化学发光试剂盒可用于检测辣根过氧化物酶 (HRP) 标记的抗体及其关联的抗原。
描述及优势:
MCE 灵敏 ECL 化学发光试剂盒用于检测辣根过氧化物酶 (HRP) 标记的抗体及其关联的抗原。HRP 标记的抗体直接或间接结合膜上的目的蛋白,在洗膜后加入本试剂盒配制的 ECL 工作液,即可由 HRP 催化产生化学发光,结果可通过 X 光胶片压片或 CCD 成像系统进行检测。
本产品配方独特,灵敏度高,对抗原的最低检测限度可达低皮克级别,1-2 小时内检测信号仍保持稳定。本产品配方经过优化,适用于极低浓度的抗体检测,在WB 实验中,一抗 (1 mg/mL) 储存液可稀释 1:1,000-1:4,000 倍 (终浓度约 0.25-1 μg/mL),二抗 (1 mg/mL) 储存液可稀释 1:5,000-1:10,000 倍 (终浓度约0.1-0.2 μg/mL)。持久的发光信号,极高的信噪比,保证了最佳的检测效果。
操作流程:1. 进行常规 WB 操作:电泳、转膜、封闭、HRP 标记抗体孵育、洗膜。一抗 (0.2-1 μg/mL) 室温孵育 1 h 或 4°C 过夜,洗膜后,二抗 (10-50 ng/mL) 室温孵育 30-60 min。 2. . 配制 ECL 工作液:在使用前等量混合适量 A 液和 B 液,混合后尽快使用。 3. Western 二抗孵育后,进行数次洗涤,用平头镊子将印迹膜取出,沥干膜上的洗膜液,将结合有蛋白的一面朝上,放置于洁净保鲜膜上。 4. 根据印迹膜的大小,按 0.125 mL 工作液/cm2 膜的比例滴加 ECL 工作液到膜上,确保工作液均匀覆盖在整张膜上,室温孵育 3-5 min。 5. 弃去印迹膜上的 ECL 工作液,用吸水纸吸去过多的液体。将印迹膜放在两片保鲜膜中间,随后进行压片检测或成像仪检测。 6. 压片检测:将印迹膜固定于片夹内。暗室内压片 1 分钟,立即显影定影,根据结果再调整压片时间。或直接压片 30 秒、1、3、5 分钟,然后一起显影定影观察结果。 7. 荧光成像仪检测:将印迹膜放置到荧光成像仪内,参考仪器说明书进行检测。
详情参考:http://www.medchemexpress.cn/inhibitor-kit/sensitive-ecl-kit.html
品牌介绍:• MCE (MedChemExpress) 拥有200 多种全球独家化合物库,我们致力于为全球科研客户提供前沿最全的高品质小分子活性化合物;• 50,000 多种高选择性抑制剂、激动剂涉及各热门信号通路及疾病领域;• 产品种类涵盖各种重组蛋白,多肽,常用试剂盒 ,更有 PROTAC、ADC 等特色产品,广泛应用于新药研发、生命科学等科研项目;• 提供虚拟筛选,离子通道筛选,代谢组学分析检测分析,药物筛选等专业技术服务;• 设有专业的实验中心和严格的质控、验证体系;• 提供 LC/MS、NMR、HPLC、手性分析、元素分析等各项质检报告,确保产品的高纯度、高品质;• 产品的生物活性多经各国客户实验验证;• Nature, Cell, Science 等多种顶级期刊及制药专利收录了MCE客户的科研成果;• 专业团队跟踪最新的制药及生命科学研究进展,为您提供全球最新的活性化合物;• 与世界各大制药公司及知名科研机构建立了长期的合作。
MCE(MedChemExpress)
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