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OptiLNP 基因编辑试剂盒

品牌：MedChemExpress (MCE)

货号：HY-K2027

描述及优势：脂质纳米粒 (Lipid Nanoparticles, LNP) 是一种以脂质为基础构建的纳米级药物递送系统，广泛应用于核酸（如 mRNA、siRNA、DNA 等）和小分子药物的递送。裸露的 RNA 是一种带负电荷的亲水性大分子，由于细胞膜的的静电排斥作用，RNA 难以进入细胞，且容易被 RNA 酶迅速降解。通过利用 LNP 包封 RNA，可以使 RNA 通过细胞膜并在细胞质中释放，实现高效递送。MCE OptiLNP 基因编辑试剂盒是一种基于脂质纳米粒 (LNP) 技术开发的即用型转染试剂，利用 LNP 特有的跨膜转运及逃逸机制可实现 RNA 的高效递送，适用于常规细胞（贴壁或悬浮细胞） 基因编辑时 Cas9 mRNA 和 sgRNA 的共转染。MCE OptiLNP 基因编辑试剂盒具有如下优点：1. 脂质纳米粒 (LNP) 技术：采用 LNP 载体，有效保护 RNA 免受递送过程中的降解和免疫系统清除的影响；2. 高效的细胞内递送：LNP 特有的跨膜转运及逃逸机制，微量样品的包封率超过 80%，；3. 操作简便：无需包封设备，仅需一步混合即可完成 RNA-LNP 包封并进行转染；4. 生物相容性好：细胞毒性低，能较好平衡高转染效率与细胞活力，作用温和；5. 安全：配方不含乙醇，采用可降解脂质材料，确保安全性。

操作流程：准备待转染细胞以 24 孔板为例，其它培养孔板细胞量根据常规实验设计即可。贴壁细胞：转染前一天，将消化后的细胞按照 0.1 - 1 × 105 个细胞/孔铺板，使其在转染时密度为 30% - 40%。悬浮细胞：转染当天，配制转染试剂-核酸复合物之前，先进行细胞铺板，每 500 μL 生长培养基中加入 0.5 - 2.5 × 105 个细胞。注：为提高转染效率，建议使用生长状态良好且生长处于指数期、存活率大于 90% 的细胞进行转染。 RNA 原液配制1) 用无酶水将 Cas9 mRNA（冻干）配制成 1 μg/μL 的原液。2) 用无酶水将 sgRNA 阳性对照（冻干）配制成 1 μg/μL 的原液。 制备 RNA 预混液取适量 Cas9 mRNA 原液与 sgRNA 阳性对照原液，并用稀释缓冲液将原液稀释至总 RNA 浓度为 40 ng/μL。 制备 RNA-LNP 复合物直接取等体积转染试剂与 RNA 预混液混合，用移液枪吹打 20 次以上使其充分混匀。 细胞转染将 RNA-LNP 复合物加入细胞中，轻柔混匀，置于培养箱中继续培养。 分析转染效率转染细胞培养 24 - 48 h 后，可使用荧光检测法、Western Blot、ELISA、流式细胞术、报告基因等检测转染效果，或进行后续功能实验。

详情参考：www.medchemexpress.cn/inhibitor-kit/optilnp-gene-editing-kit.html