产品信息:

1. 细胞背景与基本特性
种属来源:人 (Homo sapiens)
组织来源:正常人支气管上皮组织
细胞形态:上皮细胞样(多边形),贴壁生长
生长特性:贴壁生长,呈铺路石状排列
生物安全等级:BSL-1 / BSL-2
产品名称 | 人正常气道上皮细胞;HBE4-E6/E7 | 英文名称 | HBE4-E6/E7:HBE4E6E7 |
货号 | AXB10613 | 生长特性 | 贴壁生长 |
用途 | 仅用于科研 实验 | 种属 | 人 |
关键特性:
永生化:通过 HPV16 E6/E7 基因转染实现,细胞核型正常。
无血清培养:通常推荐使用无血清培养基(如 Keratinocyte-SFM)以抑制成纤维细胞生长并促进上皮细胞增殖。
核心参数速览

特征 描述
培养基 角质形成细胞无血清培养基 (K-SFM)
传代比例 1:2 ~ 1:3 (首次建议 1:2)
消化时间 1-2 分钟 (胰酶消化)
倍增时间 约 24-48 小时
冻存条件 无血清冻存液 或 90% FBS + 10% DMSO
详细培养操作指南

HBE4-E6/E7 对培养基成分较为敏感,推荐使用无血清培养基以获得最佳生长状态。
基础培养条件
温度:37℃
气体环境:95% 空气 + 5% CO
湿度:饱和湿度
推荐培养基配方
基础培养基:角质形成细胞无血清培养基 (Keratinocyte Serum Free Medium, K-SFM)。
注:通常包含基础培养基和添加物(如牛脑垂体提取物 BPE、表皮生长因子 EGF 等)。
替代配方:部分实验方案使用 DMEM/F12 培养基 + 10% 胎牛血清 (FBS),但无血清培养基更有利于维持细胞特性。
特殊添加:根据试剂盒说明书添加 BPE 和 EGF(例如:0.05 mg/ml BPE, 5 ng/ml EGF)。
传代操作 (当细胞密度达 80%-90% 时)
弃液:吸去旧的培养上清液。
润洗:加入适量不含钙、镁离子的 PBS 缓冲液,轻轻晃动润洗细胞层 1-2 次,弃去 PBS。
消化:加入 0.25% 胰蛋白酶-EDTA 消化液(T25 瓶加 1-2 mL),置于 37℃ 培养箱中消化 1-2 分钟。
注意:HBE 细胞贴壁相对较弱,消化时间不宜过长。
观察:待细胞大部分变圆并脱落时,进行下一步。
终止:加入含血清的完全培养基(或含血清的缓冲液)终止消化。
离心与分装:将细胞悬液转移至离心管,1000 rpm 离心 3-5 分钟。弃上清,重悬后按 1:2 至 1:3 的比例分装到新瓶中。
冻存与复苏
冻存液:推荐使用无血清细胞冻存液,或者 90% 完全培养基 + 10% DMSO(现配现用)。
复苏:37℃ 水浴快速摇晃解冻,立即转移至含完全培养基的离心管中混匀,离心去除上清(去除 DMSO),重悬后接种。
注意事项与常见问题

培养基选择:
该细胞在含血清培养基中容易分化或停止增殖。建议优先使用 K-SFM 无血清培养基,以维持其未分化状态和高增殖活性。
运输中的脱落:
由于 HBE 细胞贴壁较弱,运输途中极易脱落漂浮。收到细胞后,若发现瓶底无细胞或细胞极少,请务必离心运输培养基,将管底沉淀的细胞团块重悬接种,不要直接丢弃。
支原体检测:
上皮细胞对支原体污染较为敏感,建议定期检测。
细胞状态:
若细胞密度过低(低于 60%),生长可能会变慢,建议保持适当的密度传代。
总结:HBE4-E6/E7 是一种贴壁生长的永生化气道上皮细胞。它的培养关键在于使用无血清培养基(K-SFM)和小心处理运输后脱落的细胞。该细胞系是研究肺部炎症、氧化应激及病毒感染(如流感、新冠病毒)的良好体外模型。
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细胞类型与特性
原代细胞:直接从组织中分离的细胞,通常指第1-10代细胞,具有接近体内状态的特性。
细胞系:原代细胞首次传代成功后形成的细胞群,可连续传代。
细胞株:从原代培养或细胞系中获得的具有特殊性质的细胞,通常为第10-50代。
根据生长方式分为:
贴壁细胞:需附着在培养瓶表面生长,如成纤维细胞、上皮细胞。
悬浮细胞:在培养基中自由悬浮生长,如血液细胞。
半贴壁半悬浮细胞:兼具贴壁和悬浮生长特性。
关键字: HBE4-E6/E7;人正常气道上皮细胞;贴壁细胞;
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