SARS 冠状病毒检测试剂盒
试剂简介:
主要检测技术分类
针对SARS-CoV的检测,实验室主要采用两种策略:核酸检测(查病毒本身)和抗体检测(查人体免疫反应)。
1. 核酸检测试剂盒 (RT-PCR / 荧光定量PCR)
这是SARS诊断的“金标准”技术,用于直接检测患者呼吸道标本(如咽拭子、痰液)中是否存在病毒RNA。
产品名称 | SARS 冠状病毒检测试剂盒 | 分类 | 荧光PCR |
货号 | XG-P1623 | 用途 | 仅供科研研究实验 |
检测原理:
靶点:通常针对SARS-CoV的保守基因区域,如N基因(核衣壳蛋白基因)或RdRp基因(RNA依赖的RNA聚合酶基因)。
方法:采用逆转录聚合酶链式反应(RT-PCR)或实时荧光定量PCR(qPCR)。
特异性:优秀的试剂盒能将SARS-CoV与普通的人类冠状病毒(如OC43、229E)以及其他呼吸道病毒区分开。
操作流程:
样本采集:采集咽拭子、鼻咽抽取物或痰液。
病毒灭活与核酸提取:使用裂解液处理样本,释放并纯化RNA。
反转录:将RNA逆转录为cDNA。
PCR扩增:将cDNA加入含有引物、探针和酶的反应液中进行扩增。
结果判读:
阳性:扩增曲线呈典型的“S”型,且Ct值小于设定的阈值(如Ct<35)。
阴性:无扩增曲线。
判定标准(科研/诊断标准):
SARS-CoV RNA阳性通常需要非常严格的确认。例如,至少需要两个不同部位的标本阳性,或者间隔2天的同种标本连续阳性,以排除偶然污染。
2. 抗体检测试剂盒 (ELISA / 间接免疫荧光)
这是辅助诊断的重要手段,用于检测患者血清中是否产生了针对SARS-CoV的特异性抗体。
检测原理:
ELISA法(酶联免疫吸附试验):利用双抗夹心法或间接法。试剂盒微孔板上包被了SARS-CoV的抗原(如N蛋白或S蛋白),如果血清中有抗体,就会结合上去,再通过酶标记的二抗显色。
IFA法(间接免疫荧光法):以Vero-E6细胞(SARS-CoV易感细胞)作为抗原基质,加入患者血清,若血清中含有抗体,会在荧光显微镜下看到特异性的荧光信号。
检测指标:
IgM抗体:通常在发病后1周左右出现,提示近期感染或急性期。
IgG抗体:出现较晚,但维持时间长,提示既往感染或恢复期。
确诊标准:
单份血清IgG阳性不一定代表现症感染。
确诊依据:通常需要双份血清(急性期和恢复期),如果恢复期血清抗体滴度比急性期升高4倍或以上,才能确诊为SARS-CoV感染。
典型试剂盒组成
如果你在科研采购目录中看到“人SARS冠状病毒抗体(SARS-CoV Ab)ELISA检测试剂盒”,其内容通常如下:
组分名称 规格 (96孔板) 作用
微孔酶标板 96孔 (12孔×8条) 预包被SARS-CoV抗原,捕获抗体
标准品/阳性对照 0.5mL 已知浓度的抗体,用于绘制标准曲线
阴性对照 0.5mL 无SARS抗体的血清,作为空白对照
酶结合物 6mL-10mL HRP标记的二抗,用于显色反应
底物A液/B液 各6mL TMB显色液,反应后变蓝
终止液 6mL 硫酸溶液,使反应终止并变黄
浓缩洗涤液 25mL 20×浓缩液,需稀释后用于洗板
关键注意事项
生物安全等级极高:
SARS-CoV属于高致病性病原微生物。
病毒分离、培养需在BSL-3(生物安全三级)实验室进行。
动物感染实验需在ABSL-3实验室进行。
临床标本的灭活处理和核酸提取应在BSL-2实验室中进行,但必须穿戴更高级别的防护装备。
交叉反应风险:
早期的试剂盒容易与普通冠状病毒(OC43等)发生交叉反应。现代科研试剂盒通常会使用S蛋白(刺突蛋白)的特异性RBD区域作为抗原,以提高特异性,区分SARS-CoV和普通感冒病毒。
假阳性与假阴性:
假阴性:常见于病程早期(病毒载量低)或样本采集不当(如没采到病毒聚集部位)。
假阳性:常见于实验室污染(PCR产物污染)或非特异性抗体结合。
总结
目前所谓的“SARS检测试剂盒”主要存在于科研领域。
如果你是做病毒检测,主要看RT-PCR试剂盒,关注其引物的特异性和灵敏度(如10拷贝/反应)。
如果你是做血清学调查,主要看ELISA或IFA试剂盒,关注其抗原的纯度和抗体的亲和力。
公司正在出售的产品:
钙粘蛋白16抗体 | 细菌D-葡萄糖含量氧化法定量检测试剂盒 |
转录接头蛋白EP300抗体 | 冰冻切片组织BCL2蛋白表达荧光显微镜检测试剂盒 |
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粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子受体α抗体 | 艾滋病病毒制约锚定蛋白抗体 |
细胞C-TAK激酶活性定量检测试剂盒(A/B/C) | Importin 13蛋白抗体 |
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乳品果胶生物酶比色法定量检测试剂盒 | 乙酰化P53(Lys382)抗体 |
组织PDGFRβ激酶活性定量检测试剂盒(A/B/C) | APC标记人CD25单克隆抗体 |
植物基因组DNA纯化试剂盒(高多糖/酚) | SARS 冠状病毒检测试剂盒冰冻切片免疫组织化学AP酶联NBT/BCIP完全间接检测试剂盒 |
纯化大鼠肾上腺髓质素(AM)基因重组表达载体(pcDNA-AM) | 细胞核因子p105/k基因结合核因子重组兔单克隆抗体 |
基质金属蛋白酶-15抗体 | PE-Cy7标记人CD123单克隆抗体 |
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