商品属性
产品名称 | LN229+LUC人胶质瘤细胞荧光素酶标记 | 英文名称 | LN229+LUC |
规格 | 1×106 | 货号 | P-X821 |
母系来源 LN229 (人胶质母细胞瘤细胞)
标记基因 Luciferase (荧光素酶)
抗性基因 通常携带 Puro (嘌呤霉素) 抗性
物种来源 人 (Homo sapiens)
组织来源 脑 (额顶枕叶胶质母细胞瘤)
细胞形态 上皮细胞样
生长特性 贴壁生长
标记类型：稳定表达荧光素酶（Firefly Luciferase, LUC）
应用：肿瘤研究、体内外生物发光成像（BLI）、药物筛选、转移模型构建等。
规格：
冻存细胞：1 × 10^6 cells/vial
培养状态细胞：T25培养瓶（贴壁生长，80%密度）
储存条件：液氮（冻存细胞）或37℃培养（活细胞）
关键特性
荧光素酶活性：
稳定表达Firefly Luciferase基因，可通过D-荧光素底物产生生物发光信号。
推荐底物：150 μg/mL D-Luciferin（需单独购买）。
细胞背景：
亲本细胞LN229：人胶质母细胞瘤细胞系，EGFR扩增、PTEN突变，常用于肿瘤侵袭和放疗研究。
标记方法：慢病毒转导或质粒转染，经抗生素（如Puromycin）筛选获得稳定株。
检测数据：
发光强度：约1×10^8 RLU/10^6 cells（需验证仪器条件）。
稳定性：连续传代10代后荧光素酶活性保持>90%。
培养条件
培养基：DMEM（高糖）+ 10% FBS + 1% Pen/Strep + [筛选抗生素，如2 μg/mL Puromycin]。
培养环境：37℃, 5% CO₂。
传代比例：1:3至1:5（每2-3天传代，80%汇合时）。
质量控制
无菌检测：支原体、细菌、真菌阴性（ELISA/PCR验证）。
荧光素酶表达：流式细胞术或发光检测确认>95%阳性率。
实验流程示例（体内成像）
细胞准备：皮下或原位注射LN229-LUC细胞（如5×10^5 cells/小鼠）。
成像步骤：
注射D-Luciferin（150 mg/kg，腹腔注射）。
10分钟后用IVIS成像系统检测发光信号。
注意事项
冻存细胞复苏后需稳定培养1-2代再实验。
长期培养建议定期用抗生素维持筛选压力。
避免反复冻融，推荐使用专业细胞冻存液（如90% FBS + 10% DMSO）。
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