K5裂解酶ARecombinant K5 Lyase A

来自大肠噬菌体的重组K5裂解酶A是一种有用的工具，用于结构分析硫酸肝素，并通过在具有类肝素结构和低硫酸盐含量的NAc结构域内裂解硫酸肝素，生产低分子量、高修饰的类肝素低聚糖。更重要的是，它可以通过β消除机制将大肠杆菌K5荚膜多糖(也称为K5肝素)特异性降解为较小的低聚糖，在非还原端以Δ4,5GlcA在232 nm吸收。这也是K5多糖纯度分析和K5低聚糖制备的有效工具。K5 裂解酶 A，也叫 KflA，是来源于大肠噬菌体 K5A 的尾刺蛋白，常作为重组酶用于糖化学相关的科研与实验领域

核心功能

1.特异性降解底物：对大肠杆菌 K5 荚膜多糖（又称 K5 肝素）和硫酸肝素降解效果显著，可将 K5 多糖降解为八糖、六糖、四糖和双糖等低聚糖，但无法降解肝素。并且它对 K5 多糖的降解具有剂量依赖性，即酶的用量会影响降解效果。

2.助力多糖研究与分析：是硫酸肝素结构分析的实用工具，能生产低分子量、高修饰的类肝素低聚糖；同时也是 K5 多糖纯度分析和 K5 低聚糖制备的有效工具，还可辅助补充肝素裂解酶，用于肝素和硫酸肝素的相关分析工作。

还原性(R)或非还原性(NR)条件下未煮(non -boil)和煮熟重组K5裂解酶A的SDS-PAGE分析

(a) 1 μg K5裂解酶a 和200 μg不同底物(K5多糖、硫酸肝素或肝素)在250 μl测定缓冲液(25 mM Tris acetate, 50 mM NaCl, pH 8.5) 37℃的最终反应体积下的时间活性曲线;

(b)用1 μg K5裂解酶A在最终反应量为20 μl的测定缓冲液中，在37℃浸泡过夜，PAGE模式显示K5裂解酶A能显著降解K5多糖(K5PS)和硫酸肝素(HS)，对肝素无显著降解作用。