人ALK阳性间变性大细胞淋巴瘤；SU-DHL-1
商品属性
产品名称 | 人ALK阳性间变性大细胞淋巴瘤；SU-DHL-1 | 英文名称 | SU-DHL-1 |
规格 | 1×106 | 细胞形态 | 悬浮生长 |
货号 | P-X10907 | 细胞生长 | 圆形细胞 |
别名：SUDHL1、SuDHL-1、Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-1
物种来源：人源（胸腔积液转移，男性）
细胞类型：间变性大细胞（ALK阳性）
生长特性：悬浮生长
形态特征：圆形细胞
培养条件与操作规范
传代方法：
传代比例：1:2至1:4（首次建议1:2）
消化条件：室温胰酶消化1-3分钟（若为贴壁亚型需调整）。
换液频率：每周2-3次（悬浮细胞需离心保留细胞沉淀）。
培养基：通用培养基（如RPMI-1640+10% FBS）。
无菌操作：严格避免污染，建议在生物安全柜中操作。
背景信息
疾病模型：源于ALK阳性间变性大细胞患者胸腔积液，常用于发病机制、靶向及药物筛选研究。
操作指南
1. 细胞复苏
快速解冻：37℃水浴快速摇晃，1-2分钟内使冻存液完全融化。
稀释：将含细胞的冻存液转移至离心管，缓慢加入4-5mL预热完全培养基。
离心：1000 rpm (约 150-200g) 离心 3-5 分钟。
重悬：弃上清，加入新鲜完全培养基重悬细胞。
接种：接种于 T25 培养瓶，放入培养箱培养。
观察：次日观察贴壁情况，建议更换新鲜培养基以去除死细胞。
2. 细胞传代 (关键步骤)
时机：细胞密度达到 80%-90% 融合度时进行传代。
洗涤：吸去旧培养基，用 PBS 轻轻润洗细胞 1 次。
消化：加入适量 0.25% Trypsin-EDTA，37℃ 培养箱中消化 1-2 分钟。
观察：显微镜下观察，待细胞大部分变圆并脱落时，立即加入完全培养基终止消化。
吹打：轻轻吹打使细胞完全脱落并混匀。
离心与分装：
1000 rpm 离心 3-5 分钟。
弃上清，加入新鲜培养基重悬。
按 1:2 至 1:3 的比例分装到新瓶中。
3. 细胞冻存
收集：按传代方法收集对数生长期的细胞。
计数：调整细胞密度至 1×106 ～ 1×1071×107 cells/mL。
配制冻存液：推荐使用 90% FBS + 10% DMSO。
分装：将细胞悬液分装入冻存管（1mL/管）。
梯度降温：
使用程序降温盒（-1℃/min）放入 -80℃ 冰箱过夜。
次日转入液氮罐长期保存。
质量控制
STR鉴定：提供STR图谱以确保细胞系真实性。
支原体检测：阴性（标准流程验证）。
运输与保存：液氮冻存或干冰运输，复苏后需稳定传代3代以上再用于实验。
应用限制
仅限科学研究，不可用于临床或动物实验
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