人非小细胞肺癌细胞;NCI-H1299-luc-EGFP
商品属性
产品名称 | 人非小细胞肺癌细胞;NCI-H1299-luc-EGFP | 英文名称 | NCI-H1299-luc-EGFP |
规格 | 1×106 | 细胞形态 | 贴壁生长 |
货号 | P-X11320 | 细胞生长 | 上皮细胞样 |
背景来源：源于人非小细胞（NSCLC）淋巴结转移灶（43岁男性患者），经基因工程改造，稳定表达荧光素酶（luciferase） 和绿色荧光蛋白（EGFP）。
特性：
p53基因纯合缺失；
适用于活体成像（luciferase）、荧光追踪（EGFP）及药物筛选实验。
培养条件与试剂
培养基：
RPMI-1640 + 10% 胎牛血清（FBS） + 1% 双抗（青霉素-链霉素）。
需添加 G418（500 μg/mL） 维持抗性（依据工程改造要求）。
培养环境：
温度：37℃；气体：5% CO₂，95%湿度。
传代试剂：
0.25% 胰蛋白酶-EDTA，PBS缓冲液。
培养操作指南
复苏流程：
37℃水浴快速解冻 → 离心（1000 rpm, 5 min）→ 重悬于新鲜培养基 → 接种T25瓶 → 24小时后换液。
传代操作：
密度达80%-90%时进行；
PBS清洗 → 胰酶消化1-2分钟（37℃）→ 含血清培养基终止 → 按 1:3~1:5 比例分瓶。
冻存方法：
冻存液：90% FBS + 10% DMSO；
程序降温：4℃ 30min → -20℃ 2h → -80℃过夜 → 液氮长期保存。
关键注意事项
改造基因稳定性：
定期检测荧光素酶/EGFP表达（建议每5代进行一次），防止信号丢失。
污染防控：
严格无菌操作，定期支原体检测。
消化控制：
避免过度消化损伤细胞（显微镜下观察细胞变圆即终止）。
细胞状态异常处理：
出现空泡、漂浮细胞增多时，更换新批次血清或培养基。
应用领域
肿瘤转移机制研究、活体成像（生物发光）、药物敏感性测试、放疗/化疗疗效评估。
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关键字： 人非小细胞肺癌细胞;NCI-H1299-luc-EGFP;