脱氢酶(DHA)测定试剂盒/分光光度法/48样
测定意义:
脱氢酶(dehydrogenase, DHA) 是一类催化物质氧化还原反应的酶,催化底物通过细胞色素系统被氧化,释放的能量供机体使用,是生物体取得能量的一种方式。
测定原理:
在细胞呼吸过程中,氢受体 2, 3, 5 - 氯化三苯基四氮唑(2,3,5-Triphenyl Tetrazolium Chloride, TTC)在脱氢酶作用下接受氢以后,被还原为三苯基甲鐟(Triphenyl Formazone, TF),TF 呈现红色,在波长 485nm 处有最大吸收峰,采用分光光度法于 485nm 测定其吸光值,即得脱氢酶活性。
自备仪器和用品:
筛子、天平、恒温培养箱或水浴锅、低温离心机、可见分光光度计/酶标仪、微量石英比色皿/96 孔板、冰、蒸馏水、甲醇(不允许快递,请用户自备)。测定步骤和操作表:
空白管
测定管
样品(μL)
150
蒸馏水(μL)
试剂一 (μ L)
试剂二(μL)
充分混匀,37℃培养 24h
试剂三(μL)
1350
振荡 1h ,8000g ,25℃ , 离心 5min ,取 1mL 上清于比色皿,测定 A485,△A=A 测定-A 空白管。空白管只
要做一管。
注 意:
正式测定之前选择 2-3 个预期差异大的样本做预测定。
上海酶联生物科技有限公司
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