双缩脲法蛋白含量测定试剂盒/分光光度法/48S
测定意义:
样品可溶性蛋白质含量常常用于酶活性计算。此外,可溶性蛋白质含量也用于食品等质量分析。
测定原理:
强碱性溶液中,双缩脲与 CuSO4 形成紫色络合物;紫色络合物颜色的深浅与蛋白质浓度成正比,而与蛋白质分子量及氨基酸成分无关,故可用来测定蛋白质含量。该方法测定范围为 1~10mg 蛋白质,适用于蛋白质浓度高的样品,尤其是动物材料。
自备仪器和用品:
离心机、可见分光光度计、移液器、1 mL 玻璃比色皿和蒸馏水。测定操作:1. 分光光度计预热 30 min ,调节波长到 540 nm,蒸馏水调零。
2. 空白管:取 1 mL 玻璃比色皿,加入 200μL 蒸馏水,1000μL 试剂一,混匀后室温静置 15 min ,于 540nm比色,记为 A 空白管。
3. 标准管:取 1 mL 玻璃比色皿,加入 200μL 标准液,1000μL 试剂一,混匀后室温静置 15 min ,于 540 nm比色,记为 A 标准管。
4. 测定管:取 1 mL 玻璃比色皿,加入 200μL 待测液,1000μL 试剂一,混匀后室温静置 15 min ,于 540nm比色,记为 A 测定管。注 意:
正式测定之前选择 2-3 个预期差异大的样本做预测定,确保蛋白浓度在 1~10mg/ml 范围内。
上海酶联生物科技有限公司
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