焦磷酸:果糖-6-磷酸-1-磷酸转移酶(PFP)测定试剂盒/分光光度法/48样
测定意义:
焦磷酸:果糖-6-磷酸-1-磷酸转移酶(PFP ,EC2.7.1.90)是一种胞质酶,广泛存在于植物组织中,催化果糖-6-磷酸与果糖-1,6-二磷酸之间的可逆转化,在光合作用碳代谢中起重要作用。
测定原理:
PFP 催化 6-磷酸果糖转化为 1,6-二磷酸果糖,它在醛缩酶和磷酸丙糖异构酶的作用下转变为 3-磷酸甘油醛,再由 3-磷酸甘油醛脱氢酶和 NADH 催化生成 3-磷酸甘油酸、NAD 和磷酸,340nm 处的吸光度变化反映了 PFP的活性的高低。
自备仪器和用品:
天平、低温离心机、研钵、紫外分光光度计、1 mL 石英比色皿。测定操作:
1. 分光光度计预热 30min ,调节波长至 340nm,蒸馏水调零。
2. 取 1mL 石英比色皿,依次加入 580μL 试剂一,100μL 试剂二,100μ L 试剂三,10μ L 试剂四,10μ L 试剂五,100μL 试剂六,100μ L 粗酶液,充分混匀,记录 340nm 处 10s 的吸光值 A1 和 310s 的吸光值 A2△A=A1-A2。注 意:
正式测定之前选择 2-3 个预期差异大的样本做预测定。
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