NADH氧化酶(NOX)测定试剂盒/分光光度法/48样
测定意义:
NOX(EC 1.6.99.3)广泛存在于动物、植物、微生物和培养细胞中,可在氧气存在下,直接将 NADH 氧化为 NAD 。该酶不仅参与 NAD 的再生,而且与免疫反应密切相关。
测定原理:
NOX 能够将 NADH 氧化为 NAD,NADH 的氧化与 2,6 二氯酚靛蓝(DCPIP)的还原相偶联,蓝色的 DCPIP被还原为无色的 DCPIP ,在 600nm 下测定蓝色 DCPIP 的还原速率计算出 NADH 氧化酶活性的大小。
自备仪器和用品:
可见分光光度计、台式离心机、水浴锅、可调式移液器、1mL 玻璃比色皿、研钵、冰、蒸馏水测定步骤:
1、 分光光度计预热 30min 以上,调节波长至 600nm,蒸馏水调零。
2、 样本测定
(1)试剂四、试剂五和试剂六于 37℃(哺乳动物)或 25℃(其它物种)孵育 5min。
(2)在 1mL 石英比色皿中加入 40μL 样本、700μL 试剂四、100μL 试剂五和 160μL 试剂六,混匀,记录 600nm 处 20s 时吸光值 A1 和 1min20s 后的吸光值 A2 ,计算 ΔA=A1-A2。注 意:正式测定前务必取 2-3 个预期差异较大的样本做预测定。
上海酶联生物科技有限公司
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