乙醇脱氢酶(ADH)测定试剂盒/微量法/96S
测定意义:
ADH 是生物体内短链醇代谢的关键酶,催化乙醇与乙醛可逆转换,在很多生理过程中起着重要作用。哺乳动物 ADH 主要在肝脏生成,肝脏损伤导致 ADH 释放到血清中。血清 ADH 活性高低反映了肝功能是否异常。
测定原理:
ADH 催化 NADH 还原乙醛生成乙醇和 NAD+ ,NADH 在340nm 处有吸收峰,而 NAD+没有;测定 340nm吸光度下降速率,来计算 ADH 活性。
自备仪器和用品:
研钵、冰、低温离心机、紫外分光光度计/酶标仪、微量石英比色皿/96 孔板、可调式移液器和蒸馏水ADH 测定操作:
1. 分光光度计/酶标仪预热 30 min ,调节波长到 340 nm,蒸馏水调零。
2. 试剂三在 25℃水浴中保温 30 min。
3. 在微量石英比色皿/96 孔板中依次加入 20μL 样本上清液、160μL 试剂三和 20μL 试剂四,迅速混匀后于340nm 测定吸光值变化,分别记录 15s 和 75s 时吸光值,分别记为 A1 和 A2 。△A 测定管=A1-A2。注 意:正式测定之前选择 2-3 个预期差异大的样本做预测定。
上海酶联生物科技有限公司
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