人肝癌细胞+GFP;hepG2-coGFP-PURO 新品

人肝癌细胞+GFP;hepG2-coGFP-PURO

商品属性

细胞基本信息

基础细胞株：HepG2人肝癌细胞（人源，男性15岁）

生长特性：贴壁生长，上皮细胞样形态 。

培养体系：

MEM/EMEM + 10%胎牛血清（FBS）+ 1%双抗（青霉素-链霉素）。

培养条件：37℃、5% CO₂恒温培养箱 。

改造标签说明（需特别注意）：

GFP（绿色荧光蛋白）：需通过荧光显微镜观察表达情况。

PURO（嘌呤霉素抗性）：培养时需添加**嘌呤霉素（Puromycin）**维持筛选压力。

重要提醒：参考资料未提供改造株的具体参数，以上标签特性需以实际购买的细胞株说明书为准！

细胞接收与复苏流程

消毒处理：

75%酒精喷洒细胞瓶表面，移入超净台操作。

静置稳定：

37℃培养箱静置3-4小时，再更换新鲜完全培养基。

状态确认：

显微镜下观察细胞密度、形态（贴壁率≥80%可直接传代）。

务必拍照留存（40x~200x），前3天照片为售后依据 。

传代与冻存步骤（通用方法）

传代流程 ：

弃旧培养基 → PBS润洗1-2次。

加入0.25%胰酶1-2mL，37℃消化1-2分钟（显微镜下观察至细胞变圆脱落）。

加5mL完全培养基终止消化 → 离心（1000rpm, 5min）→ 重悬。

按比例分瓶：

普通HepG2：建议1:2或1:3传代 。

改造株建议：首次传代按1:2分瓶，其中一瓶保留原培养基对比培养效果 。

冻存条件 ：

冻存液配方：90% FBS + 10% DMSO 或 商品化无血清冻存液。

细胞密度：≥1×10⁶ cells/mL。

改造株特殊注意事项

筛选维持：

培养基中持续添加嘌呤霉素（浓度需根据细胞株特性优化）。

GFP表达监测：

定期用荧光显微镜确认荧光强度，避免传代后表达丢失。

支原体检测：

改造株污染风险较高，建议每月检测 。
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