脂氧合酶(LOX)测定试剂盒/微量法/48S

脂氧合酶(LOX)测定试剂盒/微量法/48S

测定意义：

LOX 广泛存在于动植物组织中，催化不饱和脂肪酸氧化反应，导致膜脂过氧化。在生物体的生长发育、成熟衰老及逆境胁迫过程中具有重要作用。

测定原理：

LOX 催化亚油酸氧化，氧化产物在 280nm 处有特征吸收峰；测定 280nm 吸光度增加速率，来计算 LOX 活性。

自备仪器和用品：

研钵、冰、台式离心机、紫外分光光度计/酶标仪、微量石英比色皿/96 孔板（UV 板）、可调式移液枪和蒸馏水。

测定：
1. 分光光度计/酶标仪预热 30 min 以上，调节波长到 280 nm，蒸馏水调零。

2. 在试剂三中加入 10mL 试剂二（振荡混匀 1min），在 30℃水浴中预热 10 min 以上。用不完的试剂 4℃保存。

3. 对照管：依次在微量石英比色皿/96 孔板中加入 20μL 样本和 180μL 试剂二，30℃反应 30min 后，记录 A对照。

4. 测定管：依次在微量石英比色皿/96 孔板中加入 20μL 样本和 180μL 试剂三，30℃反应 30min 后，记录 A测定。

5.  ΔA=A 测定-A 对照。

注 意：

正式测定之前选择 2-3 个预期差异大的样本做预测定。