禽类肉瘤病毒染料法荧光定量RT-PCR试剂盒
商品属性
产品名称 | 禽类肉瘤病毒染料法荧光定量RT-PCR试剂盒 | 英文名称 | Avian Sarcoma Virus Dye-based qRT-PCR Kit |
规格 | 50T | 货号 | PR3237 |
产品概述
本试剂盒采用染料法荧光定量RT-PCR技术，专用于禽类肉瘤病毒（Avian Sarcoma Virus, ASV）的快速、高灵敏度检测。适用于科研领域，不可用于临床诊断。
产品特点
即开即用：用户仅需提供病毒RNA模板，操作简便。
高特异性：针对ASV保守序列设计引物，与其他禽类病毒无交叉反应。
高灵敏度：检测下限可达数百拷贝/反应。
防污染设计：一管式闭管检测，避免扩增产物污染。
稳定可靠：提供阳性对照，便于结果判读。
规格及组分
| 成分 | 包装规格 | 保存条件 |
| 2×qPCR MagicMix | 500 μL（棕色管） | -20℃避光保存 |
| 荧光PCR专用模板稀释液 | 1 mL（黄盖） | -20℃保存 |
| ASV PCR引物混合物 | 100 μL（白盖） | -20℃避光保存 |
| ASV PCR阳性对照（1×10⁸拷贝/μL） | 50 μL（红盖） | -20℃保存 |
| 使用手册 | 1份 | 常温保存 |
运输与保存
运输条件：低温运输（冰袋或干冰）。
保存条件：-20℃避光保存，有效期12个月。
自备试剂
RNA模板（需无DNA污染）。
10×ROX校正染料（根据PCR仪器型号选择，详见手册）。
使用方法
1. 阳性对照稀释（以10²~10⁷拷贝/μL梯度为例）
标记6管稀释液（7~2号），每管加45 μL模板稀释液。
取5 μL阳性对照（10⁸拷贝/μL）加入7号管，震荡混匀，得10⁷拷贝/μL梯度。
依次稀释至2号管，获得6个浓度梯度（10²~10⁷拷贝/μL）。
注意：
稀释需在独立区域操作，避免污染。
使用带滤芯枪头，每步更换枪头。
2. PCR反应体系（20 μL/反应）
| 组分 | 体积（μL） |
| 2×qPCR MagicMix | 10 |
| ASV引物混合物 | 2 |
| 模板RNA/阳性对照 | 2 |
| RNase-free水 | 补至20 |
3. 扩增程序
逆转录：50℃ 15分钟
预变性：95℃ 5分钟
扩增循环（40次）：95℃ 15秒 → 60℃ 1分钟（采集荧光）
结果分析
以Ct值≤35且扩增曲线呈“S”形判为阳性。
阴性对照应无扩增（Ct值≥40或无信号）。
注意事项
实验分区操作（试剂配制区、样本处理区、扩增区）。
避免反复冻融试剂，溶解后需短暂离心。
本产品仅限科研使用，严禁临床诊断。
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