检验原理

本试剂盒基于SYBR Green染料法实时荧光PCR技术,针对鲑鱼源性成分基因高度保守区域设计特异性引物。通过扩增目标核酸并监测荧光信号强度,实现定性(有无鲑鱼成分)和定量(拷贝数分析)检测。线性定量范围覆盖5个数量级,特异性强,可避免与其他物种DNA交叉反应。
产品名称 | 鲑鱼源性成分染料法荧光定量PCR试剂盒 | 英文名称 | Salmon-derived Component Dye-based qPCR Kit |
产品规格 | 50T | 产品分类 | 荧光定量PCR |
检测类型 | PCR检测 | 产品货号 | PR3148 |

试剂组成

鲑鱼源性成分扩增液:50μL×1管(含引物、SYBR Green染料等)
阳性对照:无传染性DNA片段(1×10^8拷贝/μL),用于标准曲线制备及质控。
荧光PCR专用模板稀释液:用于标准品梯度稀释(需独立操作以防污染)。
操作步骤

标准曲线制备(以10^2~10^7拷贝/μL梯度为例):
标记离心管(2~7号),每管加入45μL稀释液。
取5μL阳性对照加入7号管(终浓度10^7拷贝/μL),依次稀释至2号管(10^2拷贝/μL)。
样本处理:待测样本DNA提取后与标准品同步上机检测。
PCR扩增:
反应体系:20μL(含扩增液、模板DNA)。
程序:预变性(95℃, 5min)→循环扩增(95℃ 10s, 60℃ 30s, 40次)→熔解曲线分析。
注意事项

防污染:标准品稀释需在独立区域操作,使用带滤芯枪头。
质控要求:每批次实验需包含阴性对照(无模板)及阳性对照。
数据判读:通过Ct值及熔解曲线峰型确认特异性扩增,定量结果需基于标准曲线。
储存与运输
保存温度:-20℃避光保存,避免反复冻融。
有效期:12个月(生产日期见包装标签)。
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关键字: 鲑鱼源性成分;染料法荧光定量;PCR试剂盒;
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